心肌营养素1促进人脐血间充质干细胞神经分化存活及PI3K/Akt信号通路机制研究

发布时间：2023-04-11 23:11

　　目的:研究心肌营养素1(CT1)对人脐血间充质干细胞(h UCB-MSCs)向神经方向诱导及存活的作用,并探讨磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在此过程中的机制。方法:(1)通过密度梯度离心结合贴壁筛选法从人脐血中分离、培养、纯化间充质干细胞(MSCs),流式细胞术鉴定;(2)采用不同感染复数(50,100,200 PFU/cell)的Adv-CT1-EGFP转染h UCB-MSCs,摸索最佳转染复数;(3)选用感染复数100PFU/cell转染h UCB-MSC后,用谷氨酸、无血清高糖及维甲酸为神经诱导培养基(NIM),利用免疫荧光技术检测诱导后6h及4d神经蛋白巢蛋白(nestin)及β-微管蛋白Ⅲ(βⅢ-tubulin)表达;(4)CCK8及TUNEL技术检测神经诱导分化后6h及4d细胞存活及凋亡率;(5)加或不加PI3K/Akt特异性阻断剂LY294002,用Western blot法分别检测神经诱导分化后细胞Akt、p-Akt及凋亡相关蛋白Bax、Bak、Bcl-2、caspase3及cleved-caspase3表达。结果:(1)密度梯度结合贴壁筛选...

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1 材料与方法
2 结果
3 讨论
4 结论
参考文献
附图
综述
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致谢
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