NOB1影响胶质瘤细胞增殖、凋亡的实验研究

发布时间：2023-04-18 21:06

　　目的利用RNA干扰（RNAi）在人胶质瘤U251和U87-MG细胞中沉默NOB1（NIN1/RPN12binding protein1homolog）基因的表达，探讨NOB1对恶性胶质瘤细胞增殖以及凋亡的影响。 方法利用免疫组化技术对56例不同级别人胶质瘤组织中NOB1的表达及与病理分级相关性进行分析。构建NOB1基因的短发卡（shRNA）慢病毒表达载体，包装成病毒颗粒，其中用绿色荧光蛋白（GFP）作为报告基因。将GFP慢病毒颗粒按照不同感染复数（MOI）感染不同胶质瘤细胞（U251、U87-MG），48h后经荧光镜检检测GFP表达阳性率以判定感染率，以此确定最优MOI（感染复数）。将NOB1基因的shRNA慢病毒颗粒以优化的条件感染培养的胶质瘤细胞，在24h收集RNA样本，36h收集蛋白样本，通过real-time PCR与NOB1抗体的Western blot实验验证siRNA对于NOB1基因的在mRNA和蛋白水平的沉默效率。在U87-MG、U251细胞利用优化慢病毒感染条件，稳定沉默NOB1基因，实验分为：空白对照，阴性对照，RNAi实验组三组，分别进行MTT实验检测胶质瘤细胞的...

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

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英文缩略词表
摘要
Abstract
1 前言
2 材料与方法
3 结果
4 讨论
5 结论
6 参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3793035