GBP2在神经胶质瘤中的生物学功能及分子机制研究

发布时间：2023-04-22 14:01

　　目的:本研究探讨了鸟苷酸结合蛋白2(GBP2)在神经胶质瘤(GBM)细胞中的生物学功能及分子机制。方法:我们首先利用TCGA数据库及我们收集的GBM病人样本和细胞系分别从m RNA和蛋白水平分析了GBP2的表达情况。然后从体外研究了GBP2的生物学功能,从多种神经胶质瘤细胞系中分别选取低表达及高表达GBP2的神经胶质瘤细胞,分别对其进行外源性的基因高表达及基因沉默,通过划痕实验检测细胞运动,通过WST-1法检测细胞增殖水平,通过细胞侵袭实验检测细胞的侵袭能力,从正反两方面研究GBP2在神经胶质瘤细胞中的生物学效应。其次是机制研究,通过q RT-PCR检测细胞运动、侵袭相关基因的表达水平,Western Blot法验证并检测信号通路中的纤连蛋白(FN1)以及磷酸化的信号转导与转录激活因子(Signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的表达水平。最后是体内实验研究,通过裸鼠皮下成瘤实验研究GBP2在体内对肿瘤生长的影响;通过裸鼠颅内成瘤实验及组织切片免疫组化实验研究GBP2在颅内的侵袭作用;通过动物生存实验研究GBP2对...

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中文摘要
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1 序言
2 材料和方法
    2.1 实验对象
    2.2 主要实验试剂
    2.3 主要实验耗材
    2.4 主要实验仪器
    2.5 常用实验溶液的配制
    2.6 实验方法
        2.6.1 细胞培养与细胞转染
        2.6.2 慢病毒制备和感染
        2.6.3 WST-1法测定GBP2对神经胶质瘤细胞增殖的影响
        2.6.4 细胞划痕实验检测GBP2对胶质瘤细胞运动能力的影响
        2.6.5 qRT-PCR检测受GBP2诱导的与细胞侵袭相关基因表达
        2.6.6 细胞侵袭实验检测GBP2对胶质瘤细胞侵袭和转移能力的影响
        2.6.7 Western bolt检测GBP2、FN1、p-Stat3、Stat3的表达
        2.6.8 异种移植模型和组织学分析
    2.7 统计学方法
3 结果
    3.1 GBP2在神经胶质瘤中表达增高
    3.2 GBP2在神经胶质瘤中的表达水平与病人的预后呈负相关
    3.3 过表达GBP2能促进神经胶质瘤细胞的迁移能力
    3.4 GBP2在体外对神经胶质瘤细胞增殖无影响
    3.5 过表达GBP2能促进神经胶质瘤细胞的侵袭能力
    3.6 GBP2可诱导FN1等肿瘤相关因子的表达
    3.7 FN1参与GBP2调控的细胞侵袭作用
    3.8 GBP2通过STAT3-FN1通路促进胶质瘤细胞侵袭作用
    3.9 GBP2表达促进裸鼠神经胶质瘤的生长
    3.10 裸鼠动物模型显示GBP2表达可促进胶质瘤肿瘤侵袭
    3.11 裸鼠动物模型显示GBP2表达缩短裸鼠的生存时间
4 讨论
5 结论
参考文献
综述
    参考文献
中英文缩略词表
攻读硕士期间的科研成果
致谢



本文编号：3797777