AAV9介导的CRISPR/SaCas9安全性评价初步研究

发布时间：2023-04-28 21:12

　　背景杜氏肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)是一种X连锁隐性遗传的致死性肌肉变性疾病,主要由编码抗肌萎缩蛋白(dystrophin)的DMD基因突变导致,临床表现为进行性加重的肌肉损伤。目前该病尚无有效的治疗手段,主要通过糖皮质激素和康复训练等临床综合治疗来延缓疾病进程,但即使有医疗护理,大多数DMD患者多在30岁之前死于心脏或呼吸衰竭。近年来CRISPR/Cas9技术被广泛应用于DMD的基因治疗研究中。CRISPR/Cas9基因编辑系统可对特定序列进行靶向编辑,实现对DMD基因永久性靶向外显子跳跃,校正突变破坏的阅读框架从而恢复dystrophin蛋白的表达。目前已有大量体内外研究评估CRISPR/Cas9治疗DMD的效果,其成功率各不相同。尽管CRISPR/Cas9介导的基因编辑在DMD的长期治疗中已显示出一定潜力,但其临床转化应用中仍面临着脱靶,体内基因递送和免疫应答激活等诸多安全性问题。因此CRISPR技术的安全性评价是我们研究的重点。本研究在体外确定并构建小鼠Dmd基因23外显子上下游的高效靶点。同时在小鼠体内通过活体荧光成像技术评价A...

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
中英文缩略表
引言
第一部分 基于CRISPR系统的体外Dmd基因23号外显子靶点设计及效果验证
    前言
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
    4 结论
第二部分 腺相关病毒9型(AAV9)在小鼠体内的分布情况
    前言
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
    4 结论
第三部分 人血清、羊水及脐带血中SaCas9蛋白抗体的检测
    前言
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
    4 结论
全文结论
参考文献
综述 CRISPR/Cas9 技术在DMD治疗中的应用
    参考文献
个人简历及硕士期间发表论文及获奖情况
致谢



本文编号：3804487