ABCB1基因多态性及甲基化与脑卒中患者阿司匹林抵抗的相关性研究

发布时间：2023-05-27 00:09

　　一、研究目的1.研究脑卒中患者中ABCBl基因多态性的分布特征。2.探讨脑卒中患者的ABCBl基因启动子区甲基化水平与基因多态性的相关性。3.初步探究脑卒中患者ABCBl基因多态性及启动子区甲基化水平与阿司匹林抵抗的相关性。二、研究方法1.检测样本的ABCBl基因的多态性本研究共纳入脑卒中患者302例,根据其血栓弹力图(thrombelastogram,TEG)的检测报告分组:阿司匹林抵抗(aspirin resistance,AR)组及阿司匹林敏感(aspirin sensitive,AS)组。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术(PCR-RFLP)和DNA直接测序两种方法共同对ABCB1基因的C1236T、G2677T/A和C3435T三个位点进行基因多态性的检测。脑卒中患者ABCBl基因各位点的基因多态性采用SHEsis软件进行在线分析。2.检测样本ABCBl基因启动子区的甲基化程度使用重亚硫酸盐修饰后的限制性内切酶(combined bisulfite restriction analysis,COBRA)法对入组的脑卒中患者进行ABCBl基因启动子区甲基化水平的检测...

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
第一部分 ABCB1基因多态性与AR
    第一章 材料与方法
        1.1 材料
            1.1.1 研究对象及纳入标准
            1.1.2 主要仪器及设备
            1.1.3 主要试剂及配置溶液
            1.1.4 实验材料
        1.2 实验方法
            1.2.1 标本采集
            1.2.2 提取全基因组DNA
            1.2.3 紫外光度计鉴定提取的 DNA 浓度和纯度
            1.2.4 PCR扩增
            1.2.5 PCR扩增产物的电泳
            1.2.6 PCR扩增产物的酶切
            1.2.7 酶切产物的电泳
            1.2.8 PCR 扩增产物的直接测序
        1.3 统计分析
    第二章 结果
        2.1 AS组和AR组临床资料的比较
        2.2 ABCB1基因SNPs位点的基因型
        2.3 ABCB1基因SNPs位点的单倍体分析
    第三章 讨论
第二部分 ABCB1基因启动子区甲基化与AR
    第一章 材料与方法
        1.1 材料
            1.1.1 研究对象及纳入标准
            1.1.2 主要仪器和设备
            1.1.3 主要试剂及溶液配置
            1.1.4 实验材料
        1.2 实验方法
            1.2.1 标本采集
            1.2.2 全基因组DNA的提取
            1.2.3 DNA的重亚硫酸盐修饰
            1.2.4 甲基化PCR反应
            1.2.5 甲基化PCR扩增产物的电泳
            1.2.6 甲基化PCR扩增产物的酶切
            1.2.7 酶切产物的电泳
            1.2.8 甲基化PCR扩增产物直接测序DNA
            1.2.9 甲基化水平的扫描
        1.3 统计分析
    第二章 结果
        2.1 ABCB1基因启动子区甲基化状态与AR的相关性分析
        2.2 ABCB1基因多态性与启动子区甲基化水平的相关性
        2.3 ABCB1基因启动子区甲基化水平与AA%的相关性
    第三章 讨论
    第四章 结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的科研成果
中英文对照
致谢



本文编号：3823529