贝伐单抗通过激活自噬对脑胶质瘤细胞化疗耐药的影响

发布时间：2023-06-05 19:10

　　目的:探讨贝伐单抗对脑胶质瘤细胞的抑制作用以及脑胶质瘤细胞对贝伐单抗产生耐药性的发生机制。方法:体外培养脑胶质瘤细胞(U87-MG细胞系)。①使用不同浓度的贝伐单抗来处理U87-MG细胞,处理时间持续24小时或者48小时,随后使用MTT试剂盒检测不同浓度贝伐单处理条件下U87-MG细胞的存活率,用以检验贝伐单抗对脑胶质瘤细胞的直接抑制效应;②使用不同浓度的贝伐单抗处理U87-MG细胞48小时,使用Annexin V-FITC/PI试剂盒及流式细胞仪检测细胞凋亡情况,用以检验贝伐单抗对脑胶质瘤细胞的促凋亡效果;③使用不同浓度的贝伐单抗处理脑胶质瘤细胞48小时后,直接裂解细胞并进行Western Blot检测自噬过程中标志性蛋白:LC3B-I、LC3B-II和SQSTMI(p62)表达水平变化,以及LC3B-II/LC3B-I比例变化,用以验证贝伐单抗是否诱导脑胶质瘤细胞产生自噬;④U87-MG细胞在不同浓度贝伐单抗的存在的的情况下培养48小时,裂解细胞,处理样品和总蛋白定量后,进行丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot检测。使用靶向Akt S473位点和T308位点磷酸化的抗体来检测...

【文章页数】：88 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 研究背景和内容
    1.1 研究背景
    1.2 研究内容
第二章 研究材料和方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验方法
第三章 研究结果
    3.1 贝伐单抗能够直接抑制脑胶质瘤细胞的增殖
    3.2 贝伐单抗能够直接促进脑胶质瘤细胞的凋亡
    3.3 贝伐单抗能够诱导脑胶质瘤细胞产生自噬
    3.4 贝伐单抗通过抑制AKT-MTOR信号通路诱导脑胶质瘤细胞产生自噬
    3.5 氯喹能够显著抑制贝伐单抗诱导的脑胶质瘤细胞自噬
    3.6 抑制自噬过程能够增强贝伐单抗对于脑胶质瘤细胞的促凋亡功能
第四章 讨论和展望
参考文献
综述
    参考文献
附录
致谢



本文编号：3831878