Rho/ROCK信号通路对重症肌无力患者外周血单核细胞IL-17A和IL-23的作用

发布时间：2023-08-07 17:48

　　目的:探讨Rho/ROCK信号转导通路在重症肌无力(MG)患者中的作用。方法:收集34例MG患者和25例健康正常人外周血标本,获取人外周血单个核细胞(PBMCs)进行体外培养。以不同浓度ROCK抑制剂盐酸法舒地尔(HF)处理MG患者PBMCs,并观察其对细胞活力的影响。蛋白免疫印迹(Western bloting)法检测ROCK-2的蛋白表达;实时荧光定量PCR(qPCR)和酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白细胞介素(IL)-17A、IL-23、IL-22在PBMCs中mRNA和细胞上清液中的蛋白表达。结果:与健康对照组相比,MG患者的ROCK-2蛋白表达升高(P<0.01),PBMCs中IL-17A mRNA、IL-23 mRNA水平和蛋白水平均升高(P<0.05,P<0.01)。使用HF阻断Rho/ROCK信号通路后显著下调MG患者PBMCs的IL-17A mRNA、IL-23mRNA表达(P<0.05,P<0.05)以及蛋白水平(P<0.05,P<0.01)。IL-22 mRNA水平及蛋白表达水平未见明显改变(P>0.05)。结...

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【文章目录】：
1 对象与方法
    1.1 研究对象
    1.2 材料与方法
        1.2.1 实验试剂
        1.2.2 主要试剂配置
        1.2.3 密度梯度离心法分离PBMCs
        1.2.4 HF对PBMCs细胞活力影响的检测
        1.2.5 蛋白免疫印迹（Western bloting）法检测PBMCs细胞中ROCK-2蛋白的表达量
        1.2.6 实验分组及处理
        1.2.7 实时荧光定量PCR(q PCR）法检测各组PBMCs中IL-17A m RNA、IL-22 m RNA、IL-23m RNA表达
        1.2.8 PBMCs细胞上清液IL-17A、IL-22、IL-23A水平检测
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 不同浓度HF对PBMCs活力的影响
    2.2 PBMCs中ROCK-2蛋白水平
    2.3 抑制ROCK信号传导后PBMCs的IL-17A m RNA、IL-22 m RNA、IL-23 m RNA水平
    2.4 抑制ROCK信号传导后PBMCs细胞的IL-17A、IL-22、IL-23蛋白水平
3 讨论



本文编号：3840071