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匹罗卡品癫痫小鼠海马DISC1、PDE4的表达

发布时间:2023-10-19 18:36
  目的研究精神分裂症断裂基因1(Disrupted-in-Schizophrenia1DISC1)蛋白、磷酸二酯酶4(Phosphodiesterase4, PDE4)及其mRNA在匹罗卡品致癫痫小鼠海马中的表达变化,探讨其在癫痫发病过程中的作用。 方法1.将雄性C57BL/6(3-4周)小鼠(246例)随机分配入实验组(198例)和对照组(48例),实验组采用匹罗卡品小剂量给药方法建立癫痫小鼠模型。 2.采用免疫组化和Real-Time PCR定性、定量分析方法分别于癫痫持续状态(Status epilepticus,SE)后3天,7天,14天,28天检测实验组和对照组小鼠海马组织中DISC1、PDE4、PDE4B (phosphodiesterase4B磷酸二酯酶4B)和MCM2(Minichromosome maintenance protein2微小染色体维持蛋白2)的表达改变。 结果1.DISC1免疫组化阳性着色主要位于海马神经元细胞的胞浆和胞核。DISCI蛋白和mRNA的表达水平在对照组各时间点无明显差异(P>0.05)。与对照组相比:DISCI的表达水平在实验组SE后...

【文章页数】:66 页

【学位级别】:硕士

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摘要
ABSTRACT
缩略词表
第一章 前言
第二章 材料与方法
    2.1 主要试剂
    2.2 主要仪器
    2.3 溶液配制
    2.4 实验方法
        2.4.1 实验动物及分组
        2.4.2 小鼠癫痫模型的建立
        2.4.3 灌注取材
        2.4.4 冰冻切片的制备
        2.4.5 海马组织的分离与保存
        2.4.6 免疫组化
        2.4.7 Real-Time PCR检测
    2.5 统计学处理
第三章 结果观察
    3.1 匹罗卡品癫痫动物模型
        3.1.1 行为学观察
        3.1.2 造模数据统计
    3.2 免疫组化结果
        3.2.1 小鼠海马MCM2蛋白的表达
        3.2.2 小鼠海马DISC1蛋白的表达
        3.2.3 小鼠海马PDE4蛋白的表达
        3.2.4 小鼠海马PDE4B蛋白的表达
        3.2.5 相关性分析
    3.3 RT-PCR结果
        3.3.1 RNA完整性检测
        3.3.2 溶解曲线和扩增曲线
        3.3.3 各指标mRNA表达水平
第四章 讨论
    4.1 癫痫后神经细胞增生
    4.2 DISC1
        4.2.1 DISC1的分布
        4.2.2 DISC1与神经细胞增生的关系
        4.2.3 癫痫后异常神经细胞增生的后果
    4.3 PDE4
        4.3.1 PDE4的结构和分布
        4.3.2 PDE4与癫痫
        4.3.3 癫痫、抑郁、焦虑和神经增生
第五章 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
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本文编号:3855180

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