ERK激酶在拮抗P2X7受体保护大鼠脑缺血/再灌注损伤中的作用及可能机制

发布时间：2023-12-09 15:36

　　研究发现,拮抗P2X7受体可明显减轻缺血/再灌注导致的大脑损伤,且拮抗P2X7受体可抑制细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,E RK)激酶的激活,因此本实验主要是探讨ERK激酶在拮抗P2X7受体抗大鼠脑缺血/再灌注损伤中的作用及可能机制,实验中使用P2X7受体的拮抗剂亮蓝G(Brilliant Blue G,BBG)及ERK激酶的抑制剂PD98059用于研究。在体实验:制备大鼠的大脑中动脉栓塞模型,进行大脑的缺血/再灌注。离体实验:原代培养星形胶质细胞,制备星形胶质细胞的缺氧/复氧模型以模拟在体的大鼠大脑缺血/再灌注。目的:探讨拮抗P2X7受体对大鼠脑缺血/再灌注损伤的作用及可能机制。方法:1.大鼠随机分为5组:假手术(sham)组,缺血/再灌注(I/R)组,缺血/再灌注+BBG(I/R+BBG)组,缺血/再灌注+PD98059(I/R+PD98059)组,缺血/再灌注+BBG+PD98059(I/R+BBG+PD98059)组。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusio...

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中文摘要
Abstract
前言
材料与方法
    1. 材料
    2. 仪器和设备
    3. 实验方法
        3.1 实验分组和大鼠脑I/R损伤模型的制备
        3.2 神经行为学评价
        3.3 脑梗死体积的测定
        3.4 检测蛋白的表达变化
        3.5 星形胶质细胞的原代培养、纯化及传代
        3.6 星形胶质细胞纯度鉴定
        3.7 实验分组及星形胶质细胞缺氧/复氧模型制作
        3.8 星形胶质细胞存活率的检测
        3.9 细胞接种荧光示踪法检测星形胶质细胞缝隙连接功能
        3.10 Hoechst 33258 检测星形胶质细胞的凋亡情况
        3.11 蛋白提取
    4. 统计学分析
实验结果
    1. 拮抗P2X7受体对脑I/R损伤大鼠神经功能的影响
    2. 拮抗P2X7受体对脑I/R损伤大鼠脑梗死体积影响
    3. 拮抗P2X7受体对脑I/R损伤大鼠脑组织中ERK、p-ERK蛋白表达的影响
    4. 抑制ERK激酶对脑I/R损伤大鼠神经功能的影响
    5. 抑制ERK激酶对脑I/R损伤大鼠脑梗死体积影响
    6. 抑制ERK激酶对脑I/R损伤大鼠脑组织中Bax、Bcl-2 蛋白表达的影响
    7. 抑制ERK激酶对脑I/R损伤大鼠脑组织中p-ERK、ERK、Cx43蛋白表达的影响
    8. 星形胶质细胞形态学观察和纯度鉴定
    9. 拮抗P2X7受体对缺氧/复氧损伤星形胶质细胞存活率的影响
    10. 拮抗P2X7受体对缺氧/复氧损伤的星形胶质细胞细胞凋亡的影响
    11. 拮抗P2X7受体对缺氧/复氧星形胶质细胞中p-ERK蛋白表达的影响
    12. 抑制ERK激酶对缺氧/复氧损伤星形胶质细胞存活率的影响
    13. 抑制ERK激酶对星形胶质细胞凋亡的影响
    14. 抑制ERK激酶对H/R损伤星形胶质细胞中Bax、Bcl-2 蛋白表达的影响
    15. 抑制ERK激酶对H/R损伤星形胶质细胞中p-ERK、Cx43蛋白表达的影响
    16. 拮抗P2X7受体对星形胶质细胞间GJ功能的影响
讨论
    1. 拮抗P2X7受体减轻脑I/R损伤及星形胶质细胞H/R损伤
    2. 拮抗P2X7受体可以抑制ERK激酶的激活
    3. ERK激酶对缝隙连接及Cx43的调控
    4. 拮抗P2X7受体减轻脑缺血的其他可能作用机制
结论
参考文献
致谢
附录A 主要英文缩略词表
附录B 主要试剂配制方法
附录C 个人简历及已发表文章
附录D 综述
    参考文献



本文编号：3871738