CBX7在胶质瘤迁移和侵袭中的作用及机制研究

发布时间：2023-12-10 08:38

　　背景:脑胶质瘤是颅内常见的恶性肿瘤,起源于中枢神经系统,约占中枢神经系统肿瘤的45%,呈浸润生长,界限不清,手术很难完全切除。因此,进一步深入探究胶质瘤的发生发展、病灶浸润、侵袭相关的分子生物学基础就显得十分重要。PcG(Polycomb Group)家族蛋白的成员之一色素框同源蛋白7(Chromobox Protein Homolog7,CBX7)在多种肿瘤的发展过程中发挥重要的作用。上皮间充质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的过程,代表肿瘤侵袭中重要的一环。Wnt/β-catenin信号通路是研究肿瘤迁移侵袭的重要通路,而DKK1是该信号通路的抑制蛋白,而且可调节EMT样过程。现阶段关于CBX7与EMT、Wnt/β-catenin之间的关系研究尚未清晰。目的:研究CBX7在胶质瘤中的表达情况以及对胶质瘤侵袭能力的影响。方法:通过数据库分析及Western blot技术检测CBX7在正常星形胶质细胞(Astrocyte)与胶质瘤细胞(U118、A172、Ln229和T98G)之间的表达差异。采用人体标本,通过Western blot,...

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
前言
材料与方法
    实验器材
    实验试剂
    主要溶液的配制
    实验方法
        1.公共数据库
        2.人脑组织样本
        3.细胞系来源
        4.细胞培养
        5.原代细胞的提取及培养
        6.慢病毒构建和转染
        7.组织蛋白的提取
        8.细胞总蛋白的提取
        9.细胞胞浆、胞核蛋白提取(详见于凯基生物公司核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒)
        10.蛋白定量
        11.平板克隆形成实验
        12.CCK-8实验
        13.划痕实验
        14.Transwell实验
        15.3D细胞成球侵袭实验
        16.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)
        17.SDS-PAGE凝胶电泳
        18.细胞免疫荧光
        19.免疫组化
        20.双荧光素酶报告基因
        21.染色质免疫共沉淀(CHIP)
        22.动物在体实验
        23.统计方法
结果
    1.CBX7在胶质瘤的表达降低,并且和恶性程度相关。
    2.外源性过表达CBX7可以抑制胶质瘤细胞的恶性表型。
    3.上调CBX7所引起的侵袭功能抑制与上皮间质转换(EMT)和细胞基质蛋白酶(MMP)有关。
    4.上调CBX7能够抑制Wnt/β-catenin信号通路,从而抑制胶质瘤细胞侵袭功能。
    5.CBX7通过结合DKK1的启动子,从而促进DKK1的表达。
    6.上调CBX7的表达促进DKK1的活性,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路。
    7.通过颅内原位成瘤和皮下成瘤来验证CBX7的功能。
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
附录1 主要缩略词说明
附录2 主要计量单位说明
攻读硕士期间发表文章情况
致谢



本文编号：3872159