氧糖剥夺损伤诱导星形胶质细胞分泌IL-10的机制初探

发布时间：2024-02-02 07:44

　　目的:探讨氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)损伤诱导星形胶质细胞分泌白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的可能机制。方法:培养并鉴定原代星形胶质细胞,体外建立OGD损伤模型,分别利用si TLR2(Toll-like receptor-2,TLR2)腺病毒、NF-κB(NF-kappa B)抑制剂PDTC干预,q RT-PCR和ELISA分别检测损伤细胞IL-10的表达水平,Western blot检测损伤细胞TLR2、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达水平。免疫荧光检测OGD损伤细胞中NF-κB p65的亚细胞定位。结果:免疫荧光观察发现分离培养的原代星形胶质细胞纯度可达90%以上。经体外OGD损伤处理后,OGD损伤组TLR2、pNF-κB p65的蛋白表达水平[(1.16±0.10),(1.01±0.08)]与IL-10的m RNA及蛋白表达水平[(0.00±0.00),(513.01±34.47)]较正常对照组[(0.49±0.08),(0.23±0.09),(0.00±0.00),(381.8...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂
    1.2 仪器
    1.3 方法
        1.3.1 原代星形胶质细胞的培养
        1.3.2 免疫荧光检测
        1.3.3 OGD损伤模型构建及干预
        1.3.4 ELISA检测细胞因子IL-10的分泌
        1.3.5 q RT-PCR检测相关m RNA表达水平变化
        1.3.6 Western blot检测相关蛋白的表达
    1.4 统计学分析
2 结果
    2.1 大鼠原代星形胶质细胞鉴定与体外OGD损伤模型的建立
    2.2 OGD损伤后星型胶质细胞中TLR2、p-NF-κB p65及IL-10的表达变化
    2.3 si TLR2感染后细胞中TLR2、p-NF-κB p65及IL-10的表达变化
    2.4 PDTC处理后细胞中TLR2、p-NF-κB p65及IL-10的表达变化
3 讨论



本文编号：3892509