低氧联合GDNF诱导大鼠神经干细胞分化为多巴胺能神经元的实验研究

发布时间：2024-02-06 20:55

　　背景： 神经干细胞是目前颇具前景的基因工程细胞，具有自我更新、增殖及多向分化潜能。神经干细胞的增殖及分化受其所处微环境的影响，体内多种组织特别是含有干细胞的组织中氧浓度远远低于大气氧浓度，低氧对神经干细胞的增殖及分化均产生影响。 目的： 本试验在低氧环境下利用胶质源性神经营养因子对大鼠胚胎神经干细胞进行定向诱导分化，从而研究低氧对神经干细胞向多巴胺能神经元分化的影响，并获得相当数量的多巴胺能神经元，为下一步的细胞移植奠定基础。 方法： 分离培养孕14d-16d Wistar大鼠大脑神经干细胞，通过传代培养获得相当数量的神经干细胞并检测其自我更新能力，对传代至第三代的细胞进行Nestin及Brdu蛋白鉴定，在不同氧浓度下利用胶质源性神经营养因子对大鼠神经干细胞进行定向诱导分化，通过免疫细胞化学方法检测TH阳性细胞表达。 结果： 传代至第三代的神经干细胞仍能形成悬浮的细胞球，生长迅速，球体较规则，生长至1w时细胞球体积明显增大，球体规则，且第三代神经干细胞均表达Nestin及Brdu；低氧可明显促进神经干细胞向多巴胺能神经元分化，与常氧对照组比较有显著差异（p<0.01），且在3%低...

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图4.1不同氧浓度下GDNF诱导分化后多巴胺能神经元比率

表4.1不同氧浓度下GDNF诱导分化后多巴胺能神经元比率（%,x±s）氧浓度（%）常氧1%3%5%10%多巴胺能神经元比率（%）9.78±1.1014.56±1.02△25.54±1.19△14.17±0.63△11.10±0.81△不同氧浓度组与对照....

图4.2原代培养24小时细胞克隆（×200）

图4.2原代培养24小时细胞克隆（×200）图4.3原代培养48小时细胞克隆（×200）图4.4原代培养3天细胞克隆（×200）图4.5原代培养4天细胞克隆（×200）

图4.3原代培养48小时细胞克隆（×200）

图4.2原代培养24小时细胞克隆（×200）图4.3原代培养48小时细胞克隆（×200）图4.4原代培养3天细胞克隆（×200）图4.5原代培养4天细胞克隆（×200）

图4.4原代培养3天细胞克隆（×200）

图4.4原代培养3天细胞克隆（×200）图4.5原代培养4天细胞克隆（×200）图4.6原代培养5天细胞克隆（×200）图4.7原代培养6天细胞克隆（×200）

本文编号：3896175