6-OHDA所致帕金森病模型大鼠黑质Ferrportin-1基因表达及启动子甲基化状态变化

发布时间：2024-02-15 22:22

　　目的：研究6-羟基多巴胺(6-OHDA)所致帕金森病(PD)模型大鼠黑质膜铁转运蛋白1(FPl)基因表达及其启动子甲基化状态的变化。 方法：6-OHDA单侧注入大鼠内侧前脑束(MFB),免疫组化方法观察脑黑质区酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元细胞存活情况,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测黑质区FP1mRNA表达的变化,甲基化特异性PCR(MSP)检测FP1基因启动子区甲基化状态的变化。 结果：6-OHDA单侧损毁大鼠MFB后,与未损毁侧及对照组相比,损毁侧中脑黑质区TH阳性细胞显著减少(t组内=20.619,P<0.01；t组间=18.404,P<0.01),FP1表达下调(t组内=8.123,P<0.01；t组间=7.609,P<0.01)；与对照组相比,实验组注射侧FP1基因启动子区甲基化阳性率增高,差异有显著性(X2=20,P<0.01)。 结论：6-OHDA所致PD大鼠模型中黑质FP1基因表达降低,6-OHDA所致PD大鼠模型黑质FP1基因启动子区甲基化阳性率增高。FP1基因mRNA表达降低可能与FP1基因启动子区发生甲基化有关。

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一章 实验材料
    1.1 实验动物
    1.2 药品与试剂
    1.3 仪器与器材
第二章 实验方法
    2.1 动物模型制作
        2.1.1 立体定向注射
        2.1.2 成功模型的筛选
    2.2 免疫组化法TH染色
        2.2.1 冰冻切片的制备
        2.2.2 TH染色
    2.3 大鼠黑质FPl基因表达水平检测
        2.3.1 RNA的提取
        2.3.2 逆转录反应
        2.3.3 PCR反应
        2.3.4 PCR产物的定量
    2.4 FP1基因启动子区甲基化状态的检测
        2.4.1 组织DNA提取
        2.4.2 亚硫酸氢钠修饰基因组DNA
        2.4.3 修饰后DNA的纯化回收
        2.4.4 甲基化特异性PCR(MSP)
    2.5 统计学分析
第三章 实验结果
    3.1 大鼠行为变化
    3.2 6-OHDA单侧损毁MFB大鼠黑质TH染色变化
    3.3 6-OHDA单侧损毁MFB大鼠黑质FP1mRNA表达变化
    3.4 6-OHDA单侧损毁MFB大鼠黑质FP1基因启动子甲基化状态
第四章 讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间的研究成果
致谢



本文编号：3900341