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特异性抑制Rho/ROCK信号通路对脊髓星形胶质细胞增殖的影响

发布时间:2024-02-27 20:52
  目的:采用Y27632特异性抑制Rho/ROCK信号通路,观察该干预对体外培养的脊髓星形胶质细胞增殖的影响,并进一步探讨其影响增殖的可能机制。 方法:原代培养大鼠的脊髓星形胶质细胞,实验分为对照组(正常培养基)和Y27632干预组(培养基中含10μMY27632);在不同时间点(0、6、12、24和48h),计数各组细胞的数量,应用流式细胞技术检测细胞周期的分布,westernblot检测星形胶质细胞细胞周期相关蛋白(cyclinD1、cyclinE、CDK4、P27)和p-ERK的表达情况,进一步采用荧光免疫细胞染色法检测实验组摄取Brdu的细胞比例与ERK信号途径的关系。 结果:与对照组相比,Y27632干预组细胞数量显著增加(6、12、24和48h)(P<0.05),同时处于S期细胞的百分率明显上升(6h和12h,P<0.05);在不同的时间点,Y27632组细胞周期相关蛋白(cyclinD1、CDK4,cyclinE)及p-ERK1/2的表达量明显高于对照组;与对照组相比,Y27632干预组BrdU(+)的细胞比例在6、12、24h点明显增加(P<0.05),...

【文章页数】:45 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1.培养细胞的免疫组化鉴定(A)培养纯化的F2代星形胶质细胞的纯度鉴定:绿色为GFAP阳性的星形

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图2.星形胶质细胞增殖活力和数量的检测

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图4.Y27632对星形胶质细胞细胞周期相关蛋白表达的影响

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本文编号:3912954

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