宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠的相关性研究

发布时间：2024-03-11 21:50

　　目的： 本研究通过建立海人酸难治性癫痫大鼠模型,采用宁痫颗粒、卡马西平单独或联合治疗,观察海人酸难治性癫痫大鼠行为学和脑电图变化,从炎症因子、凋亡及耐药基因探讨宁痫颗粒抗癫痫作用机制,为中西医结合治疗难治性癫痫提供了新的治疗方法。 方法： 第一部分：采用海人酸海马CA3区微量注射的化学点燃方法制作模型,通过苯妥英钠及脑电图筛选成功制作慢性难治性癫痫模型36只,随机分为模型组、卡马西平组、宁痫颗粒组、宁痫颗粒低、中、高剂量联合卡马西平组,再加假手术组,共7组,每组6只。 第二部分：观察各组大鼠治疗前后体重、癫痫发作的次数、发作平均持续时间、被抓时平均防卫级别、发作级别、SRS发作总时间,并对各组大鼠治疗前后进行脑电图监测。 第三部分：难治性癫痫大鼠模型每组6只,分组治疗后与假手术组6只,予心尖灌注生理盐水后取脑,在4%多聚甲醛中固定,常规制备石蜡切片(含皮层和海马)。HE染色观察海马各区及颞叶皮层神经元形态结构的改变,免疫组化观察海马及颢叶皮层c-fos、caspase-3的表达。 第四部分：按上述治疗分组后股动脉采血,收集各实验组大鼠血清采用免疫酶联法(Elisa法)测定各实验组大鼠血...

【文章页数】：136 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
目录
英文缩略词
前言
第一部分 海人酸难治性癫痫大鼠动物模型的建立
    1 材料与方法
        1.1 实验动物
        1.2 实验药品及试剂
        1.3 实验仪器设备
        1.4 主要溶液配制
    2 研究方法
        2.1 难治性癫痫动物模型制作方法
        2.2 实验动物癫痫发作分级
        2.3 药物筛选实验动物
        2.4 难治性癫痫模型造模成功标准
    3 结果
        3.1 难治性癫痫模型的制备存活情况
        3.2 行为学观察
        3.3 急性期表现
        3.4 静止期表现
        3.5 慢性自发发作期表现
    4 讨论
        4.1 难治性癫痫动物模型的选择
        4.2 海人酸难治性癫痫动物模型评价
        4.3 海人酸难治性癫痫模型存在的问题
第二部分 宁痫颗粒联合CBZ对难治性癫痫大鼠行为学及脑电图观察
    1 材料和方法
        1.1 实验动物
        1.2 实验药品
        1.3 主要仪器设备
        1.4 主要溶液配制
    2 实验方法
        2.1 实验动物分组以及给药方法
        2.2 痫性发作行为学记录
        2.3 体重检测
        2.4 观察大鼠被抓时防卫反应分级
        2.5 Racine标准分级
        2.6 脑电图观察
        2.7 难治性癫痫大鼠模型的疗效评价
        2.8 脑电图评价
    3 统计学方法
    4 结果
        4.1 慢性期及给药致痫大鼠发作以及存活情况
        4.2 大鼠痫性发作行为学观察结果
        4.3 各组大鼠脑电图结果
    5 讨论
        5.1 宁痫颗粒“从肝论治”病机分析
        5.2 宁痫颗粒组方成分分析
        5.3 实验对照药物的选择
        5.4 各组药物对癫痫大鼠体重及行为学的影响
        5.5 脑电图变化
    小结
第三部分 宁痫颗粒联合CBZ对难治性癫痫大鼠caspase-3、c-fos表达的影响
    1 材料与方法
        1.1 实验动物
        1.2 实验药品及试剂
        1.3 主要仪器设备
        1.4 实验方法
        1.5 统计学方法
    2 结果
        2.1 HE染色结果
        2.2 免疫组化染色结果
    3 讨论
        3.1 神经元细胞凋亡、死亡与癫痫关系
        3.2 宁痫颗粒联合卡马西平对kA癫痫大鼠c-fos的影响
        3.3 宁痫颗粒联合卡马西平对kA癫痫大鼠caspase-3的影响
    小结
第四部分 宁痫颗粒联合CBZ对难治性癫痫大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α的影响
    1 材料与方法
        1.1 实验药品与试剂
        1.2 主要仪器设备
    2 实验方法
        2.1 观察指标：血清IL-1 β、IL-6、TNF-α检测
        2.2 ELISA检测
    3 统计学方法
    4 结果
        4.1 对大鼠血清IL-1β水平的影响
        4.2 对大鼠血清IL-6水平的影响
        4.3 对大鼠血清TNF-α水平的影响
    5 讨论
        5.1 癫瘸与炎症因子
        5.2 宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠IL-1β的影响
        5.3 宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠IL-6的影响
        5.4 宁瘸颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠TNF-α的影响
    小结
第五部分 宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠脑组织MDR1mRNA/P-gp表达影响
    1 材料与方法
        1.1 实验药品及试剂
        1.2 主要溶液的配制
        1.3 主要仪器设备
    2 实验方法
        2.1 荧光定量PCR法检测MDR1mRNA表达
        2.2 实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)
    3 统计学方法
    4 结果
        4.1 脑组织P-gp Western Blot检测
        4.2 对脑组织P-gp蛋白表达的影响
    5 讨论
        5.1 MDR1/P-gp表达与难治性癫痫
        5.2 宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠MDR1mRNA/P-gp表达的影响
        5.3 宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫作用的可能机制
    小结
全文讨论
全文总结
创新点及应用价值
问题与展望
参考文献
致谢
综述
    文献综述一
    文献综述二
    参考文献
附图
附件一



本文编号：3926095