膜片钳技术研究大麻素/食欲素通路干预海马神经元放电机制

发布时间：2024-03-26 04:29

　　目的采用膜片钳技术研究大麻素、食欲素受体通路对海马CA1区锥体神经元放电的影响及可能的作用机制。方法将出生15-20天的Wistar大鼠取脑,急性分离出单个CA1区锥体神经元,用膜片钳技术记录神经元电活动,观察非选择性大麻素受体激动剂Win55212-2、非选择性食欲素受体激动剂Orexin A对神经元静息电位、自发发放频率等影响。在大麻素实验中,根据神经元对Win55212-2的反应分为超极化组和去极化组;在食欲素实验中,根据神经元自身放电频率,将其分为低频组和高频组。采用MTT染色法验证组织切片及神经元活性。结果第一部分(大麻素实验组):给予大麻素受体激动剂Win55212-2,与给药前比较,给药期间超极化组神经元动作电位频率减少、膜电位显著降低[0 Hz vs. (4.3 ±3.2)Hz,p<0.05;(-57.0±4.6)mVvs. (-54.1 ±3.8)mV,p<0.01];与给药期间比较,停止给药后神经元动作电位频率增加、膜电位升高,差异有统计学意义(p<0.01)。与给药前比较,给药期间去极化组神经元动作电位频率显著减少[0 Hz vs. (6.2 ±...

【文章页数】：36 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．提取细胞所用海马组织活性检测图１Ａ?．?ＭＴＴ染色的海马组织，用于提取??

２．１脑片ＭＴＴ染色??脑片外观完整，着色纹理自然且与脑组织结构分布相一致，获取细胞标本的??脑组织定位在ＣＡ１区锥体细胞层（图１）。??图１．提取细胞所用海马组织活性检测图１Ａ?．?ＭＴＴ染色的海马组织，用于提取??细胞的ＣＡ１区锥体细胞层组织部位（箭头所示）图１Ｂ．剖面图示图....

图２．?＼Ｖｉｎ５５２１２－２致神经元超极化／去极化基本特性散点图图２Ａ．静息电位散点??图图２Ｂ．自发发放频率散点图２Ｃ．半值宽度散点图图２Ｄ．峰值和谷值散点图??

０??－８０??图２．?＼Ｖｉｎ５５２１２－２致神经元超极化／去极化基本特性散点图图２Ａ．静息电位散点??图图２Ｂ．自发发放频率散点图２Ｃ．半值宽度散点图图２Ｄ．峰值和谷值散点图??注：蓝色代表超极化组，红色代表去极化组；菱形代表峰值，三角形代表谷值??与给药前比较，给药期间超极....

图４．?Ｗｉｎ５５２１２－２致神经元去极化典型图例?图４Ａ．?Ｗｉｎ５５２Ｉ２－２抑制神经元放??电，且其作用完全被选杼性ＣＢＲ１拮抗剂ＡＭ２５１拮抗图４Ｂ．神经元相差显微镜??

与给药期间比较，停止给药后的神经元膜电位显著降低，动作电位频率显著增加，??差异有统计学意义（Ｐ＜〇．〇５）；给药前与停止给药后比较，神经元膜电位及动作电??位频率相差不大，差异无统计学意义（Ｐ＞〇．〇５，图４，表２）。??ＡＭ２５１??Ａ?Ｗｉｎ５５２１２－２?Ｗｉｎ５５２１２....

图５．?ＴＥＡ对Ｗｉｎ５５２１２－２的影响?图５Ａ．单独应用Ｗｉｎ５５２１２－２，神经元表现为??，Ｗｉｎ５５２１２－２＋ＴＥＡ，?ＴＥＡＷｉｎ５５２１２－２

?Ｄ?２０ｍＶ｜?０．５ｓ??－５２?ｍＶ??图５．?ＴＥＡ对Ｗｉｎ５５２１２－２的影响?图５Ａ．单独应用Ｗｉｎ５５２１２－２，神经元表现为??超极化，联合应用Ｗｉｎ５５２１２－２＋ＴＥＡ，?ＴＥＡ几乎完全逆转Ｗｉｎ５５２１２－２的作用图??５Ｂ．神经元相差显微镜像图５Ｃ．应用Ｗ....

本文编号：3939363