大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛后缝隙连接形态学检测

发布时间：2024-04-22 03:06

　　目的： 成功建立大鼠SAH后CVS模型，利用印度墨汁染色脑血管浇铸实验法测定和对比脑基底动脉直径的改变。应用激光扫描共聚焦显微镜、电镜等技术观察大鼠蛛网膜下腔出血脑血管痉挛前后脑基底动脉各层中Cx43和Cx40表达的改变及其缝隙连接超微结构特征，进一步探讨大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛发生机制及其缝隙连接在其中可能发挥的作用。 方法： 1、选以成年SD大鼠（南昌大学医学院动物科学部提供）作为模型动物，采用经枕大池二次注血建立蛛网膜下腔出血脑血管痉挛模型实验方法。 2、CVS模型检测：采用脑血管浇铸法测定正常组和SAH5d组大鼠基底动脉直径来证实脑血管痉挛（CVS）的存在。 3、本实验应用激光扫描共聚焦显微镜观测缝隙连接蛋白Cx43和Cx40在脑基底动脉管壁各层分布情况，应用程序图象对将其所得数字化图像进行计算机中进行处理分析。对缝隙连接蛋白Cx40和Cx43像素密度和其荧光斑面积的大小的进行准确测定，并将应用所获得的图像素密度和荧光斑面积大小来代表Cx40和Cx43的数量，从而达到对其进行准确定量分析目的。 4、应用扫描电镜和超薄切片研究方法观察大鼠SAH后脑血管痉挛前后缝隙连接（GJ...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
英文缩略语
第1章 前言
第2章 主要试剂与仪器
    2.1 实验动物
    2.2 实验试剂
        2.2.1 购置试剂
        2.2.2 主要配置试剂
    2.3 实验仪器
第3章 实验方法
    3.1 实验思路
    3.2 实验分组
    3.3 实验方法
        3.3.1 大鼠两次蛛网膜下腔出血 CVS 模型的建立
        3.3.2 大鼠基底动脉直径的测量
        3.3.3 脑基底动脉组织冰冻切片及免疫荧光染色
        3.3.4 常规电镜观测脑基底动脉血管组织标本的取材和固定
        3.3.5 电镜观察
        3.3.6 图像分析
        3.3.7 数据统计分析
第4章 实验结果
    4.1 大鼠 SAH 后 CVS 模型成功建立：
    4.2 墨汁染色后测量基底动脉直径变化：
    4.3 Cx43 和 Cx40 表达情况
    4.4 缝隙连接的电镜观察
第5章 讨论
    5.1 蛛网膜下腔出血导致脑血管痉挛研究的一般情况
    5.2 缝隙连接（GJ）结构及其功能
    5.3 大鼠经枕大池二次 SAH 后 CVS 动物模型
    5.4 脑基底动脉直径的测量
    5.5 缝隙连接蛋白 Cx43 和 Cx40 在脑血管上分布情况
    5.6 电镜下脑基底动脉及缝隙连接的超微结构改变及意义
    5.7 展望
第6章 结论
致谢
参考文献
附图
综述
    参考文献



本文编号：3961834