重组蝎氯毒素靶向抗神经胶质瘤及其肿瘤诊断研究

发布时间：2024-05-11 11:55

　　神经胶质瘤是一种起源于胶质细胞的原发性颅内肿瘤,是中枢神经系统最常见而又最难诊治的恶性肿瘤,致死率高,患者平均存活时间不到一年。近年来恶性胶质瘤的发病率也不断上升,是当前34岁以下肿瘤患者的第二位死亡原因。胶质瘤难于诊治的原因主要是因为其具有高度的浸润和转移性,增殖速度快,早期边界不明显,缺乏有效的诊断、治疗方法。研究发现,胶质瘤细胞与其它肿瘤不同之处在于它表达一种特殊的氯离子通道电流,其恶性程度与氯离子通道电流呈正相关。天然有毒动物毒液中富含有数量众多的离子通道电流抑制多肽。据此在蝎毒液中发现了对胶质瘤具有重要治疗和诊断价值的一类毒素多肽：蝎氯毒素。与此同时,基于纳米荧光材料的荧光探针检测技术越来越受到人们的重视,成为物理学、化学、生命科学与医学的重要交叉研究领域。利用蝎氯毒素的胶质瘤细胞靶向性和纳米材料的荧光特性,开展蝎氯毒素-纳米荧光复合物靶向抗神经胶质瘤及其诊断研究有重要的意义。 本文首先根据蝎氯毒素CTX多肽的一级结构序列,采用overlapping PCR方法,获得了N端连着小肠激酶酶切位点编码序列的CTX基因片段,选用原核表达载体pGEX-6p-1,构建了重组表达载体pG...

【文章页数】：111 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1 蝎毒素
        1.1 蝎的种类
        1.2 蝎毒素的组成和分类
        1.3 蝎毒素的功能
    2 蝎氯毒素的发现、结构与功能
        2.1 蝎氯毒素的发现与来源
        2.2 蝎氯毒素的分子生物学特征
        2.3 蝎氯毒素结构与功能的关系
    3 神经胶质瘤
        3.1 神经胶质瘤的起源
        3.2 神经胶质瘤的危害
        3.3 神经胶质瘤的生物学特点
        3.4 神经胶质瘤与蝎氯毒素
    4 多肽在分子成像和医学诊断中的应用
        4.1 基于多肽的成像探针的设计
        4.2 多肽探针的成像应用模式
    5 本论文的目的与意义
第二章 重组蝎氯毒素CTX的表达、纯化与鉴定
    引言
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 实验结果
        2.1 CTX表达载体的构建
        2.2 融合蛋白的表达、纯化和酶切
        2.3 CTX多肽的RP-HPLC分离纯化与鉴定
    3 讨论
第三章 蝎氯毒素-稀土纳米探针体内外对神经胶质瘤的靶向性研究
    引言
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 实验方法
    2 实验结果
        2.1 蝎氯毒素-稀土纳米探针CTX：UCNPs的制备
        2.2 蝎氯毒素-稀土纳米探针CTX：UCNPs的物理性质
        2.3 蝎氯毒素-稀土纳米探针CTX：UCNPs的体外对神经胶质瘤的靶向性
        2.4 蝎氯毒素-稀土纳米探针CTX：UCNPs的体内对神经胶质瘤的靶向性
        2.5 蝎氯毒素-稀土纳米探针CTX：UCNPs体内外的初步毒性
    3 讨论
第四章 重组蝎氯毒素蛋白靶向抗神经胶质瘤的研究
    引言
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 结果
        2.1 重组蝎氯毒素gCTX蛋白的制备与鉴定
        2.2 重组蝎氯毒素gCTX体内对神经胶质瘤生长的抑制
        2.3 重组蝎氯毒素gCTX体内对神经胶质瘤转移的抑制
        2.4 重组蝎氯毒素gCTX对体内神经胶质瘤的靶向性
    3 讨论
第五章 蝎氯毒素-金纳米簇复合物抑制神经胶质瘤细胞生长与转移研究
    引言
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 实验结果
        2.1 蝎氯毒素-金纳米簇复合物的制备
        2.2 蝎氯毒素-金纳米簇复合物的特征与鉴定
        2.3 蝎氯毒素-金纳米簇复合物对神经胶质瘤细胞的靶向性
        2.4 蝎氯毒素-金纳米簇复合物体外抑制神经胶质瘤的生长
        2.5 蝎氯毒素-金纳米簇复合物体外抑制神经胶质瘤的转移
    3 讨论
研究总结与展望
参考文献
研究生期间已发表和待发表的论文及申请的专利
致谢



本文编号：3969915