miR-448-3p通过调节KLF5的表达抑制颅内动脉瘤进展

发布时间：2024-05-24 19:19

　　目的:明确mi R-448-3p对颅内动脉瘤发展的影响。方法:我们通过结扎左侧肾动脉和左侧颈总动脉的方法建立大鼠IA模型;qRT-PCR用于检测mi R-448-3p表达;qRT-PCR和western blot用于检测KLF5 m RNA和蛋白表达;qRT-PCR和ELISA法用于检测炎症因子水平。结果:我们发现IA诱导大鼠中mi R-448-3p表达下调,而KLF5表达上调。我们发现并鉴定出KLF5是平滑肌细胞中mi R-448-3p的直接靶点。此外,mi R-448-3p处理使得IA诱导4周后动脉瘤大小和瘤腔截面积变小。mi R-448-3p处理保护了IA诱导后的壁厚比,抑制了巨噬细胞浸润。IAs引起KLF5表达显著增加,被mi R-448-3p处理后表达显著降低。我们还发现mi R-448-3p在脂多糖诱导的RAW 264.7巨噬细胞中具有抗炎作用。脂多糖促进KLF5、MMP2、MMP9的表达水平,但却被mi R-448-3p所抑制。结论:研究结果表明,mi R-448-3p可以抑制IA的进展,其机制可能是通过下调KLF5的介导的炎症反应。

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【部分图文】：

图1在IA大鼠模型中，KLF5表达上调，而miR-448-3p表达下调。（A)IA诱导4周后，IA诱导模型组和假手术组大鼠ACA/OA分叉的HE染色。（B,C）通过qRT-PCR分析，miR-448-3p和KLF5在IA大鼠和假手术组大鼠动脉壁中的表达。（D)Westernblot法检测KLF5蛋白表达。*P<0.05。

我们通过结扎左肾动脉和左颈总动脉建立大鼠IA模型。与对照大鼠相比，动脉瘤大鼠模型诱导4周后大脑前动脉/嗅动脉分叉部分的HE染色显示动脉瘤壁较薄及其破坏性严重（图1A）。为了探究miR-448-3p和KLF5在IA中的作用，我们首先检测了miR-448-3p和KLF5在IA大鼠....

图2KLF5是miR-448-3p的直接靶点。（A)miR-448-3pKLF53′UTR野生型（Wt）或突变体（Mt）目标序列。（B）萤光素酶实验。（C)miR-448-3p在转染miR-448-3pmimic模拟物或阴性对照的SMCs中表达。（D,E)KLF5在转染miR-448-3pmimic模拟物或阴性对照的SMCs中mRNA和蛋白表达。*P<0.05。

动脉瘤的发生和发展涉及复杂的病理机制，但IA的分子发病机制尚不清楚。在本研究中，我们建立了IA大鼠模型，发现IA大鼠动脉壁中miR-448-3p表达较对照组减少，而KLF5表达增加。我们发现miR-448-3p通过其对巨噬细胞的抗炎作用防止了IA的生长。KLF5被发现是mi....

图3miR-448-3p治疗对IA诱导有较强的预防作用。（A,B）检测miR-448-3p和KLF5在IA组和IA+miR-448-3p组中的表达。在IA诱导后4周制备ACA/OA分叉处诱导的IA标本，并测量（C）动脉瘤大小，（D）壁厚比，（E）动脉瘤管腔面积和（F）巨噬细胞浸润病灶的数目。*P<0.05。

图2KLF5是miR-448-3p的直接靶点。（A)miR-448-3pKLF53′UTR野生型（Wt）或突变体（Mt）目标序列。（B）萤光素酶实验。（C)miR-448-3p在转染miR-448-3pmimic模拟物或阴性对照的SMCs中表达。（D,E)KLF5....

图4miR-488-3p过表达抑制IA中巨噬细胞浸润和活化。（A-D)qRT-PCR法检测CD68、MCP-1、TNF-α和IL-6在IA大鼠和miR-488-3p处理IA大鼠组动脉壁中的表达。（E)ELISA法检测炎性细胞因子MCP-1、TNF-α和IL-6水平。（F)Westernblot检测KLF5、MMP2、MMP9蛋白在对照组、LPS组和LPS+miR-448-3p组中的表达情况。*P<0.05。

研究表明KLF5参与低氧肺动脉高压、心肌肥厚和动脉粥样硬化发展[18-20]。一项研究表明，在腹主动脉瘤的发展过程中，足细胞的形成和巨噬细胞的迁移需要依赖于KLF5对Myo9b/RhoA的调节[21]。然而，KLF5参与IA形成的可能作用和机制尚不清楚。在此，我们确定KLF5....

本文编号：3981134