体外培养原代皮质神经元重度糖氧剥夺/复糖复氧模型筛选与亚低温有联合作用的神经保护剂的研究

发布时间：2024-05-26 22:50

　　研究背景 中国脑血管病年均发病率为193-779/10万,死亡率81-441/10万不等,已经成为中国第一位的死因和致残原因。缺血性脑血管病——脑梗死占脑血管病的大多数,其中大面积脑梗死的死亡率可高达80%,且绝大部分导致严重残疾。脑血管病的高发病率、高致死率、高致残率,给社会和家庭带来沉重的负担。 如何降低大面积脑梗死的致残率和致死率是目前研究的热点和难点。脑缺血后神经细胞的损害是一系列缺血级联效应的后果,包括线粒体功能紊乱、细胞内钙超载、高钠和低K+、ROS和NO生成增加、兴奋性氨基酸毒性、炎性因子及粘附分子释放增加、微血管阻塞、血脑屏障破坏、Caspase蛋白家族的级联激活等。在梗死后几分钟到几天,不同的病理过程在时间上互相重叠并起到推波助澜的作用。脑梗死病变区按缺血的程度可分为缺血核心区和缺血半暗带区。核心区内细胞因完全缺血、过度激活的兴奋性神经递质／受体的毒性等致使细胞在几分钟内死亡。缺血半暗带区的细胞因缺血后周边侧枝循环的再灌注,还有存活的可能。由于再灌注时间窗只有4.5h,许多患者就诊时核心区的细胞已不可逆死亡,因此靶向干预缺血半暗带区是目前实验研究和临床治疗的主要目标。...

【文章页数】：146 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1-2原代皮质神经元不同糖氧剥夺时间TUNEL/DAPI染色Iniagel-2TUNEL/DAPIStainingofPrimaryCerebrocorticalNeuronsSufferedVariousDurationsofOGD

1.4.2糖氧剥夺时间蹄选不同糖氧剥夺时间后皮质神经元TUNEL染色阳性率见图1-2及表1-3。图1-2原代皮质神经元不同糖氧剥夺时间TUNEL/DAPI染色Iniagel-2TUNEL/DAPIStainingofPrimaryCerebrocorticalNeur....

图1-3原代皮质神经元不同糖氧剥夺时间后凋亡率(TUNEL/DAPI染色）

表1-3原代皮质神经元不同糖氧剥夺时间TUNEL染色阳性-3ThePositiveRatesofTUNELStainingforCulturedPrimaryCNeuronsSufferedVariousDurationsofOGD阳性率TUNEL/....

图1-5不同亚低温方案对OGD/R后原代神经元细胞调亡率的影响(TUNEL染色）

我们选用34°C亚低温4.5小时作为下一步亚低温的治疗方案。*表示与其他各组均有差异，**表示仅与某些组有差异。见图1-5，表1-5。图1-4原代皮质神经元细胞OGD/R后给予不同亚低温方案治疗后TUNEL/DAPI染色Imagel-4TheApoptosisRateof....

图2-1神经元细胞标准曲线

不同密度的神经元细胞ODs值见表2-1，以细胞密度为横坐标，ODs值为纵坐标，做神经元细胞标准曲线，见图2-1。随着神经元密度的增高，其ODs值也随之增高，ODs在1.5-2的细胞密度是最佳的细胞密度，因此，我们选用3-5xl05/cm2作为CCK-8实验的最佳细胞密度。表2-1....

本文编号：3982410