SCN2A基因致颞叶癫痫机制研究以及Cu/Zn SOD基因治疗研究

发布时间：2024-05-30 02:50

　　很多疾病的致病机理中都有自由基的因素,对于神经系统来说也不例外。细胞放电会造成自由基的增加,如超氧自由基和羟自由基等。自由基可通过抑制谷氨酸合成酶的作用造成兴奋性神经递质谷氨酸的增加,从而诱发癫痫。也有研究表明自由基的增多,自由基反应增强,就会引起细胞膜的构型、结构及通透性的改变。这种膜的改变也就改变了神经细胞膜和突触的功能,改变了膜离子通道的密度和分布,改变了阂值,从而影响Na+Ca2+流,使Ca2+进入细胞内,从而导致进行性的去极化,造成神经元的去极化偏移(Depolarization shift,DS),出现反复的、过度的同步放电,也就是引起了临床的癫痫发作。但是,机体同时也具有保护性机制,体内存在着清除自由基系统,这种系统包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GP)、谷胱甘肽还原酶(GR)、过氧化物酶(POD)及葡萄糖—6—磷酸酶(G6P)等。有许多研究报道了SOD与癫痫之间可能存在的关系。 大量的研究表明,基因突变与癫痫有着密切的关系,其中尤其是钠通道基因突变。人类编码钠通道仪亚基的基因一共有11个,其中只有SCN1A、SCN2A、SCN3A...

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【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
目录
縮略词表
前言
第一章 颞叶癫痫患者皮层组织SCN2A和Cu/Zn SOD表达特征研究
    1 实验材料
        1.1 病例
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器设备
        1.4 主要溶液的配制
    2 实验方法
        2.1 realtime PCR
        2.2 Western blot
        2.3 ELISA法检测样品中Cu/Zn SOD含量
        2.4 Cu/Zn SOD酶活测定
        2.5 统计学分析
    3 结果
        3.1 颞叶癫痫患者皮层组织与正常组织中SCN2A mRNA水平的表达差异
        3.2 颞叶癫痫患者皮层组织与正常组织中SCN2A蛋白水平的表达差异
        3.3 颞叶癫痫患者皮层组织与正常组织中Cu/Zn SOD含量差异
        3.4 颞叶癫痫患者皮层组织与正常组织中Cu/Zn SOD酶活差异
    4 讨论
第二章 SCN2A干扰对SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞Cu/Zn SOD酶活的影响
    1 实验材料
        1.1 细胞株
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器设备
        1.4 主要溶液的配制
    2 实验方法
        2.1 SCN2A干扰载体的构建
        2.2 Realtime PCR
        2.3 反转录
        2.4 免疫荧光分析
        2.5 ELISA法检测样品中Cu/Zn SOD含量
        2.6 Cu/Zn SOD酶活测定
        2.7 统计学分析
    3 结果
        3.1 SCN2A干扰载体测序
        3.2 SCN2A细胞转染分析
        3.3 SCN2A干扰载体转染细胞后Cu/Zn SOD的含量分析
        3.4 SCN2A干扰载体转染细胞后Cu/Zn SOD的酶活分析
        3.5 膜片钳结果
    4 讨论
第三章 SCN2A干扰后Cu/Zn SOD对SH-SY5Y保护作用的影响
    1 实验材料
        1.1 细胞株
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器设备
        1.4 主要溶液的配制
    2 实验方法
        2.1 SCN2A干扰载体的构建及转染
        2.2 Realtime PCR
        2.3 Western blot
        2.4 免疫荧光分析
        2.5 ELISA法检测样品中Cu/Zn SOD含量
        2.6 Cu/Zn SOD酶活测定
        2.7 统计学分析
    3. 结果
        3.1 SCN2A干扰和Cu/Zn SOD过表达转染
        3.2 SCN2A干扰和Cu/Zn SOD过表达转染细胞后Cu/Zn SOD的含量分析
        3.3 SCN2A干扰和Cu/Zn SOD过表达转染细胞后Cu/Zn SOD的酶活分析
        3.4 膜片钳结果
    4 讨论
全文结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间主要研究成果
致谢



本文编号：3984461