新一代血脑屏障3D体外模型的构建与应用研究

发布时间：2025-01-14 04:07

　　研究背景:血脑屏障(Blood Brain Barrier,BBB)是中枢神经系统(Central Nervous System,CNS)内高度进化的微血管功能单位,是存在于循环血液与中枢细胞外液之间的一道关键屏障。血脑屏障可以有效的阻止血液中有害物质进入中枢神经系统。然而当中枢神经系统内发生疾病时,血脑屏障也同样限制了药物进入中枢神经系统,使中枢神经系统疾病的治疗变得困难。为此,人们不断探索血脑屏障在生理和病理条件下,各种功能性细胞之间是如何进行联系,以及一些关键蛋白的表达和调控机制。更为重要的是,通过这些研究,将有助于发现更为合理治疗中枢神经系统相关疾病的新方法。各种血脑屏障模型作为血脑屏障机制研究及新型药物研发的载体,主要划分为两大类,(1)体内模型,(2)体外模型。体内模型及动物模型,虽然很多传统的动物模型被用于中枢药物的筛选与研发,但因为存在种属差异和药效预测能力差等原因,无法实现真实模拟人类血脑屏障的目的。因此,如果应用人类细胞在体外建立一个高保真的血脑屏障模型,那么,一方面可以提高中枢候选药物早期药效(向脑组织渗透的能力等)筛查的准确性,加速神经治疗药物的研发过程;另一方面...

【文章页数】：123 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1.1血脑屏障模式图

图1.1血脑屏障模式图成血脑屏障的主要细胞及蛋白结构内皮细胞细胞（Endothelialcells，EC）是起源于中胚层由鳞状上皮细胞胞，其功能是形成血管内壁。与其他组织中的内皮细胞相比，皮细胞具有其独特的性质。中枢神经系统内皮细胞通过特有的ightjunction）紧密....

图1.2Transwell模式图

图1.2Transwell模式图，从不同来源所获得的中枢血管内皮细胞，如小鼠，大被用于Transwell实验装置中。这些动物来源的内皮细易，有利于控制实验花费以及具有良好的稳定性及可重应用[32,33]。但是，针对应用动物细胞来构建体外模型问题：当这些细胞不是人类起源....

图1.3新一代血脑屏障3D体外模型模式图

动物模型被用于中枢药物的筛选与研发，但因为种属差异大预测能力差等原因，无法实现真实模拟人类的目的[55]。因胞在体外建立一个高保真的血脑屏障模型，那么，一方面可早期药效(向脑组织渗透的能力等)筛查的准确性，加速过程；另一方面也可以减少，甚至替代动物实验，保障动物相关文献报....

图2.1低粘附琼脂糖凝胶培养板制备（4）细胞计数及模型制作

图2.1低粘附琼脂糖凝胶培养板制备数及模型制作工作台中，使用负压吸引器将人类星形胶质细胞，人类脑脑血管内皮细胞（hCMEC/D3）三种细胞培养瓶内的原有入10毫升无菌PDS对细胞进行漂洗30秒。引PBS后，加入1毫升0.25%胰酶-EDTA溶液，并放回....

本文编号：4026384