Notch1对神经胶质瘤细胞“干性”及多药耐药性的调节

发布时间：2017-06-11 02:10

  本文关键词：Notch1对神经胶质瘤细胞“干性”及多药耐药性的调节，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:1.研究Notch1基因与人神经胶质瘤U251细胞“干性”的关系。2.探讨人胶质瘤中Notch1信号与多药耐药之间的关系。方法:1.通过慢病毒包装、转染、筛选,分别获得高表达NICD的U251细胞株和Notch1基因敲低的U251细胞株,并通过Western Blotting及免疫荧光染色进行鉴定。2.流式细胞术检测和比较NICD高表达和Notch1基因敲低的U251细胞中CD133+细胞的比例。3.免疫荧光染色检测NICD高表达和Notch1基因敲低的U251细胞的Nestin、GFAP的表达情况。4.肿瘤细胞球培养,计算和比较NICD高表达和Notch1基因敲低的U251细胞球形成率。5.SCID小鼠致瘤实验,检测NICD高表达的U251细胞的成瘤能力。6.MTT法检测上述各组细胞经化疗药物BCNU、VM-26处理后细胞生存率的变化。7.Rhodamine123检测各组细胞药物外排功能。结果:1.成功建立了高表达NICD和Notch1基因敲低的U251细胞株。2.流式细胞术结果显示NICD高表达的U251细胞中CD133+细胞率与对照组相比明显增高,Notch1基因敲低的U251细胞中CD133+细胞率与对照组相比降低。3.免疫荧光染色结果显示,NICD高表达组细胞的Nestin荧光强度明显强于其对照组,GFAP荧光强度明显低于其对照组;而Notch1基因敲低组细胞的Nestin荧光强度明显弱于其对照组,GFAP则明显强于其对照组。4.肿瘤干细胞培养结果显示NICD高表达组细胞球形成率高于对照组,Notch1基因敲低组细胞球形成率低于其对照组。5.SCID小鼠致瘤实验结果显示,NICD高表达组细胞的致瘤能力明显强于对照组细胞。6.MTT实验结果显示,在化疗药物VM-26(1.5μM)或BCNU(150μM)作用下,NICD高表达组细胞生存率明显高于对照组细胞;Notch1基因敲低组细胞生存率则明显低于对照组细胞。7.药物外排实验结果显示,NICD高表达组细胞的药物外排功能强于其对照组,Notch1基因敲低组细胞的药物外排功能弱于其对照组。结论:Notch1基因表达水平的改变可以影响人神经胶质瘤细胞U251的干细胞特性及多药耐药性,Notch1可望作为逆转胶质瘤耐药性的潜在靶点。
【关键词】：神经胶质瘤 干性 多药耐药 Notch1 CD133 Rhodamine123
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.41
【目录】：

• 英文缩略词表4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 材料与方法13-30
• 1 材料13-19
• 2 方法19-30
• 结果30-45
• 讨论45-50
• 结论50
• 参考文献50-55
• 综述55-66
• 参考文献61-66
• 致谢66

【参考文献】

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1 毕长龙;方加胜;陈风华;王延金;伍军;;CD133~+胶质瘤干细胞化疗耐受机制分析[J];中南大学学报(医学版);2007年04期

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本文编号：440546