卒中后免疫抑制与核因子κB作用研究

发布时间：2017-07-03 13:24

  本文关键词：卒中后免疫抑制与核因子κB作用研究

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【摘要】：背景：脑卒中的治疗是神经病学领域面临的一项巨大挑战。在全球,卒中是60岁以上人口第二大死亡原因,是15-59岁人口第五大死亡原因。在我国,每年有250万新发脑卒中患者,脑卒中与恶性肿瘤、心血管系统疾病构成三大致死原因,其中卒中患者致死率的首要原因是感染。近年来研究表明,中枢神经系统损伤可使机体免疫功能受到抑制,增加机体感染率,这一现象与机体交感神经系统激活存在密切关系。关于脑卒中发生后中枢神经系统如何诱导免疫系统产生反应,目前并无定论,主流思想认为这一过程与下丘脑-垂体-肾上腺轴和交感神经系统均有一定关系,两条信号通路也有各自的依据,但都无法完全解释卒中后免疫抑制发生的所有现象,近期在细胞与分子层次的研究证实环-磷酸腺苷活性增强可以诱发核因子κB活性的下降,而核因子κB正是机体中促炎抗炎因子的调控点,它的活性下降可以导致促炎抗炎因子的失衡进而出现机体免疫受到抑制的现象,因此本次实验着重探讨卒中后免疫抑制与脾脏中环-磷酸腺苷、蛋白激酶A、核因子κB的关系。目的：探讨环-磷酸腺苷、蛋白激酶A、核因子K B在卒中后免疫抑制中的变化。方法：实验分四组：假手术组、假手术+异丙肾上腺素组、MCAO组、MCAO+普萘洛尔组,每组8只大鼠,其中MCAO组与MCAO+普萘洛尔组采用成年雄性Sprague-Dawley大鼠制作大脑中动脉闭塞模型。MCAO+普萘洛尔组在模型制备后2h、14h、26h、38h、50h、62h腹腔注入交感神经抑制剂普萘洛尔(10mg/kg),假手术+异丙肾上腺素组在行假手术后2h、14h、26h、38h、50h、62h腹腔注入交感神经激动剂异丙肾上腺素(10mg/kg),72h心脏采血5m]与取出脾脏,血液静置半小时,4℃条件下3700r/min离心10min,留取血清,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定促炎细胞因子肿瘤坏死因子α (TNF-α)和抗炎细胞因子白细胞介素-10(IL-10)水平,评价机体免疫状态。采用竞争性酶联免疫吸附法测定脾脏环-磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate)和蛋白激酶A (Protein kinaseA)含量,采用Western blot法测定核因子κB (NF-κB p65)含量。结果：与假手术组相比,假手术+异丙肾上腺素组、MCAO组、MCA0+普萘洛尔组的cAMP和PKA显著上升(P0.01),NF-κB p65含量降低(P0.05),MCAO组与MCA0+普萘洛尔组的促炎因子TNF-a显著下降(P0.01),抗炎因子IL-10显著上升(P0.01),其中MCAO组变化更明显；假手术+异丙肾上腺素组促炎因子有轻度下降(P0.05),抗炎因子有显著上升(P0.01)；与MCAO组相比,MCAO+普萘洛尔组与异丙肾上腺素组的促炎因子TNF-α均上升(P0.01),抗炎因子IL-10均下降(P0.01),cAMP和PKA减少(P0.01),NF-κB p65含量升高(P0.05)；与治疗组相比,异丙肾上腺素组cAMP和PKA减少(P0.01),NF-κB p65含量无统计学差异。结论：MCAO可引起脾脏中环-磷酸腺苷、蛋白激酶A的升高,核因子κB含量减少,进而引起血清中促炎、抗炎因子失衡而导致免疫抑制。
【关键词】：免疫抑制 交感神经 核因子κB
【学位授予单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R743.3
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 中英文缩略词表10-12
• 前言12-13
• 文献综述 卒中后免疫抑制干预的研究进展13-23
• 1. 卒中后免疫抑制13-19
• 1.1 卒中后免疫抑制的证据13-15
• 1.2 脑卒中后免疫抑制的机制15-19
• 2. 卒中后免疫抑制的干预手段19-22
• 2.1 预防性使用抗生素19-20
• 2.2 β受体阻滞剂20-21
• 2.3 积极护理21
• 2.4 细胞疗法21-22
• 2.5 物理治疗22
• 3. 总结22-23
• 1、材料和方法23-33
• 1.1 材料23
• 1.2 动物分组与模型制作23-24
• 1.3 技术路线24-25
• 1.4 神经功能缺失体征评分25
• 1.5 MRI扫描25-26
• 1.6 清与脾脏组织标本收集26
• 1.7 指标测定26-27
• 1.8 ELISA法检测血清细胞因子27-33
• 1.9 统计学处理33
• 2. 研究结果33-36
• 3. 讨论36-37
• 4. 结论37-38
• 参考文献38-41
• 致谢41-42
• 作者简介42
• 研究生期间发表论文42

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