α-细辛醚调控小胶质细胞介导炎症反应的抗癫痫作用研究

发布时间：2017-07-28 22:13

本文关键词：α-细辛醚调控小胶质细胞介导炎症反应的抗癫痫作用研究

【摘要】：第一部分α-细辛醚对模型大鼠癫痫后认知功能及脑内免疫炎症反应的影响目的:研究α-细辛醚对Li-pilocarpine模型大鼠癫痫自发反复发作以及学习记忆功能的影响,并探讨α-细辛醚对癫痫后大鼠脑组织内小胶质细胞介导的免疫炎症反应的作用,以明确α-细辛醚的抗癫痫作用及其调控免疫炎症反应的关键环节及其作用靶点。方法:建立大鼠Li-Pilocarpine癫痫模型,随机分为正常对照组,模型组以及α-细辛醚干预组(200 mg.kg~(-1)),录像记录分析大鼠癫痫自发反复发作的潜伏期、频率,水迷宫实验观察各组大鼠学习记忆能力,免疫组化法观察α-细辛醚对各组大鼠脑组织内小胶质细胞活化的影响,EMSA法检测脑组织内NF-κB活化、入核,Western-blotting法检测NF-κB活化关键蛋白IκB-α、IKK-β及其磷酸化形式的表达,El ISA法检测各组大鼠脑组织内炎症因子IL~(-1)β、TNF-α含量。结果:与实验组相比,α-细辛醚干预可使大鼠自发反复发作潜伏期延长,癫痫发作频率降低(P0.05),并可改善Li-pilocapine模型大鼠癫痫后学习记忆及认知功能(P0.05);癫痫后大鼠脑内小胶质细胞活化增殖以及脑内炎症因子TNF-α、IL~(-1)β较对照组表达明显增多(P0.05),且在癫痫后3天达到高峰;与模型组相比,α-细辛醚可抑制Li-pilocapine模型大鼠癫痫后小胶质细胞活化增殖以及脑内炎症因子TNF-α、IL~(-1)β表达(P0.05);模型组大鼠癫痫后脑内NF-κB活化入核增多,其抑制单位IκB-α及IKK-β下调失活,α-细辛醚干预组大鼠脑内NF-κB活化入核减弱,而IκB-α及IKK-β表达明显高于模型组(P0.05)。结论:α-细辛醚具有确切的抗癫痫作用,且可改善癫痫后大鼠学习记忆及认知功能;α-细辛醚可抑制癫痫后大鼠脑内小胶质细胞活化和炎症因子TNF-α、IL~(-1)β表达;α-细辛醚可抑制癫痫后大鼠脑内NF-κB信号通路的激活。第二部分α-细辛醚对脂多糖诱导小胶质细胞炎症反应的影响目的:研究α-细辛醚对脂多糖(LPS)诱导大鼠小胶质细胞免疫炎症反应的影响。方法:原代培养大鼠小胶质细胞,LPS诱导活化,随机分为正常对照组、模型组和不同浓度α-细辛醚干预组,免疫荧光观察小胶质细胞形态学变化,EMSA检测各组细胞NF-κB活化入核情况,Western-blotting法检测各组细胞IκB-α、IKK-β及其磷酸化形式的表达,El ISA法检测各组炎症因子IL~(-1)β、TNF-α的变化。结果:与正常对照组比较,模型组小胶质细胞活化增强,胞内NF-κB活化入核增加,IκB-α、IKK-β下调失活,炎症因子IL~(-1)β、TNF-α表达明显增高(P0.05),并在活化后3h时达到高峰,与模型组相比,不同浓度的α-细辛醚可抑制小胶质细胞活化,并对胞内NF-κB活化入核,IκB-α、IKK-β的失活以及炎症因子的表达均有抑制作用(P0.05),其作用呈剂量依赖性,且100μg.m L~(-1)α-细辛醚作用最明显。结论:α-细辛醚可抑制LPS诱导的大鼠小胶质细胞免疫炎症反应。
【关键词】：α-细辛醚 癫痫 小胶质细胞 炎症 核因子-κB α-细辛醚 小胶质细胞 炎症 核因子-κB
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R742.1
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