Shh和Gli-1在人脑胶质瘤中表达及其相关性的实验研究
本文关键词：Shh和Gli-1在人脑胶质瘤中表达及其相关性的实验研究
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【摘要】：目的:探讨SHH(Sonic Hedgehog Signaling Pathway)信号通路起始因子Shh、核转录因子Gli-1在不同级别星形胶质细胞瘤及正常脑组织中表达及相关性。方法:1、收集2014年5月至2015年5月河北医科大学第四医院神经外科手术组织标本:星形胶质瘤组织50例(其中高级别胶质瘤36例、低级别胶质瘤14例)及正常脑组10例,经甲醛固定。星形胶质瘤标本20例(高级别胶质瘤、低级别胶质瘤各10例)、正常脑组织标本8例,-80℃冰箱冻存(正常脑组织标本来自神经外科颅脑损伤患者,术前已告知患者家属标本用途并取得患者家属同意)。2、依据WHO中枢神经系统肿瘤分类标准,定义高级别胶质瘤为WHO分级Ⅲ~Ⅳ级,低级别胶质瘤为Ⅰ~Ⅱ级。3、应用免疫组织化学(Immumohistochemistory)SP法检测Shh及Gli-1在各组织中的表达情况。4、应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测Shh及Gli-1 m RNA在各组织中表达情况。5、运用统计学软件SPSS 21.0对数据进行统计学分析。结果:1、免疫组化结果表明:Shh阳性信号定位于细胞胞膜、胞质;Gli-1阳性信号定位于细胞胞质、胞核。在高级别胶质瘤中Shh的阳性表达率为61.1%(22/36),低级别胶质瘤中Shh的阳性表达率为57.1%(8/14),正常脑组织中Shh的阳性表达率为10%(1/10),差异有统计学意义(P0.05)。在高级别胶质瘤中Gli-1的阳性表达率为69.4%(25/36),低级别胶质瘤中Gli-1的阳性表达率为28.6%(4/14),正常脑组织中Gli-1的阳性表达率为10%(1/10),差异有统计学意义(P0.05)。其中,两两对比,高级别胶质瘤与低级别胶质瘤中Shh的阳性率差异无统计学意义(P0.0125);高级别胶质瘤与正常脑组织、低级别胶质瘤与正常脑组织中Shh的阳性率差异有统计学意义(P0.0125)。高级别胶质瘤与低级别胶质瘤、高级别胶质瘤与正常脑组织中Gli-1的阳性率对比有统计学意义(P0.0125);低级别胶质瘤与正常脑组织中Gli-1的阳性率对比无统计学意义(P0.0125)。2、RT-PCR结果表明:在高级别胶质瘤中Shh m RNA的相对表达量为0.126±0.020,低级别胶质瘤中Shh m RNA的相对表达量为0.113±0.045,正常脑组织中Shh m RNA的相对表达量为0.061±0.039,差异有统计学意义(P0.05)。在高级别胶质瘤中Gli-1 m RNA的相对表达量为0.141±0.032,低级别胶质瘤中Gli-1 m RNA的相对表达量为0.074±0.044,正常脑组织中Gli-1 m RNA的相对表达量为0.040±0.024,差异有统计学意义(P0.05)。其中,两两对比,高级别胶质瘤与低级别胶质瘤间Shh m RNA相对表达量无统计学意义(P0.0125);高级别胶质瘤与正常脑组织、低级别胶质瘤与正常脑组织间Shh m RNA相对表达量有统计学意义(P0.0125)。高级别胶质瘤与低级别胶质瘤、高级别胶质瘤与正常脑组织间Gli-1 m RNA的相对表达量有统计学意义(P0.0125);低级别胶质瘤与正常脑组织间相对表达量无统计学意义(P0.0125)。3、Shh与Gli-1相关性统计:在免疫组化中,Shh与Gli-1相关系数为:0.926(P0.05);在PCR中,Shh与Gli-1相关系数为:0.588(P0.05)。结论:1、Shh、Gli-1在胶质瘤中的表达显著高于正常脑组织,提示SHH信号通路在胶质瘤细胞中是普遍激活的。2、Shh与Gli-1的表达在免疫组化及PCR中均成线性相关,提示Shh、Gli-1共同参与了胶质瘤的发生发展。3、不同级别胶质瘤中,Shh在免疫组化及PCR中的表达无统计学意义,Gli-1在免疫组化及PCR中高级别胶质瘤的表达明显高于低级别胶质瘤,提示在高级别胶质瘤中可能存在SHH信号通路中多种信号蛋白突变,如Ptch、Smo等。
【关键词】：胶质瘤 Shh Gli-1 免疫组化 RT-PCR
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.41
【目录】：
- 中文摘要4-6
- 英文摘要6-9
- 英文缩写9-10
- 前言10-11
- 材料与方法11-17
- 结果17-18
- 附图18-23
- 附表23-27
- 讨论27-30
- 结论30-31
- 参考文献31-34
- 综述 SHH信号通路及其在胶质瘤中的研究进展34-44
- 参考文献40-44
- 致谢44-45
- 个人简历45
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