GRP78及CHOP在SAH后神经元细胞凋亡中作用的研究

发布时间：2017-08-24 07:16

  本文关键词：GRP78及CHOP在SAH后神经元细胞凋亡中作用的研究

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【摘要】：目的:研究内质网应激相关因子GRP78及CHOP在蛛网膜下腔出血后大鼠海马神经元中的表达及在大鼠蛛网膜下腔出血后神经细胞凋亡中的作用。通过观察CHOP及GRP78在大鼠蛛网膜下腔出血后海马区脑组织中表达的时相性变化,分析CHOP及GRP78表达的变化与神经元细胞凋亡之间的关系,探讨其在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中细胞凋亡中的作用。为今后寻找SAH后EBI的潜在治疗靶点提供理论依据。方法:78只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=6)、假手术组(n=36)与实验(SAH)组(n=36),实验组与对照组分别在1h、6h、12h、24h、48h、72h用Garcia评分法对大鼠进行神经行为学评分,HE染色、MASSON染色鉴定模型,电镜及HE染色光镜下观察大鼠海马区神经元细胞形态改变,TUNEL法检测神经元凋亡,免疫组织化学和western blot技术检测GRP78及CHOP的表达。结果:SAH组神经行为学评分比对照组及假手术组均低(P0.05);SAH组大鼠蛛网膜下腔可见大量积血,HE和MASSON染色可见大量红细胞堆积;免疫组化观察到CHOP表达呈现时相性规律变化;电镜下能观察到不同时间点神经元细胞超微结构改变;TUNEL法检测显示空白组(2.7%±1%)与假手术组仅有极少数阳性细胞,神经元凋亡于6小时开始增多(P0.01),并于24h达到高峰,48h开始下降(P0.01),在72h组仍可见少量凋亡细胞。Western blot检测结果为实验组CHOP 6h开始增加(P0.01),24h达到高峰,48h出现减少,但仍明显高于空白组(P0.01),于72h基本恢复到术前水平,实验组GRP78于1h开始增加(P0.01),12h达到高峰,72h明显减少,但仍高于空白组(P0.01)。实验组CHOP及GRP78蛋白表达量均与TUNEL染色阳性细胞率呈正相关(r=0.933,P0.01),(r=0.723,P0.01)。结论:蛛网膜下腔出血后早期CHOP和GRP78的表达呈现规律性变化,CHOP和GRP78在蛛网膜下腔出血后内质网应激诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。
【关键词】：CHOP GRP78 蛛网膜下腔出血 早期脑损伤 内质网应激
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R743.35
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 英文缩略词8-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-24
• 1.实验材料11-16
• 1.1 主要试剂11-12
• 1.2 主要材料及仪器12-13
• 1.3 试剂配制13-15
• 1.4 实验动物15-16
• 2.实验方法16-24
• 2.1 实验路线图16-17
• 2.2 实验动物分组17
• 2.3 应用视交叉前池注血法建立大鼠蛛网膜下腔出血模型17
• 2.4 神经行为学评分17-18
• 2.5 组织的固定及处理18-19
• 2.6 HE及MASSON染色法鉴定模型19-20
• 2.7 透射电镜下观察超微结构20
• 2.8 免疫组织化学法检测蛋白表达20-21
• 2.9 TUNEL法检测细胞凋亡21
• 2.10 免疫印迹法检测蛋白表达21-23
• 2.11 统计学处理23-24
• 实验结果24-33
• 1.动物模型24-25
• 2.神经行为学评分25-26
• 3.电镜下观察神经元超微结构变化26-27
• 4.TUNEL法检测细胞凋亡27
• 5.免疫组织化学检测蛋白表达27-29
• 6.Western-blot检测CHOP和GRP78表达量的变化29-33
• 讨论33-37
• 结论37-38
• 参考文献38-42
• 综述42-49
• 参考文献47-49
• 致谢49-50
• 作者简介50-51
• 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表51

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 冯华,王宪荣,陈志,吴国材,章翔,易声禹;中药脑伤泰对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛治疗作用[J];重庆医学;2002年10期

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本文编号：729923