载脂蛋白E对脂多糖诱导NMO样星形胶质细胞损伤的影响
本文关键词:载脂蛋白E对脂多糖诱导NMO样星形胶质细胞损伤的影响
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【摘要】:目的:探讨载脂蛋白E(ApoE)对脂多糖(LPS)诱导小鼠脊髓片星形胶质细胞NMO样损伤的影响。方法:取7天大的C57BL/6野生型(WT)组和ApoE基因敲除型(ApoE-/-)组乳鼠脊髓。分别用振动切片机横向切取300um脊髓切片放到transwell中培养,每3天换一次培养液。培养到第7天加1ug/ml的LPS,设立WT-LPS组和ApoE-/-LPS组,同时用WT乳鼠设立不加LPS的正常对照组,脊髓片与LPS共孵育的第5天后,取各组脊髓片行免疫荧光检测脊髓片水通道蛋白4(AQP4)、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)及小胶质细胞标记物Ibal的表达并根据AQP4和GFAP的荧光表达情况进行脊髓片的损伤评分。用ELISA技术检测各组脊髓培养液中炎症因子TNF-a的浓度。用硝酸还原酶法检测各组脊髓培养液中NO的浓度。结果:1、与正常对照组比较,WT-LPS组、ApoE-/-LPS组脊髓片均出现明显的AQP4和GFAP的表达缺失,两组脊髓片的损伤评分均升高,而且ApoE-/-LPS组的损伤评分高于WT-LPS组(P0.05);与正常对照组比较,WT-LPS组和ApoE-/-组Ibal的表达均升高。2、ApoE-/-LPS组(55.90±6.41pg/ml)和WT-LPS组(27.42±5.54pg/m1)TNF-α的浓度均高于正常对照组(5.09±1.34pg/ml),且ApoE-/-LPS组比WT-LPS组高(P0.05)。Ap0E-/-LPS组(64.46±8.14μ mol/L)、WT-LPS组(42.29±4.70μmol/L)NO的浓度均高于正常对照组(25.54±4.28 μmol/L),且ApoE-/-LPS组的高于WT-LPS组(P0.05)。结论1、LPS刺激小鼠脊髓片小胶质细胞活化介导炎症反应可以诱导出现NMO样星形胶质细胞损伤;2、ApoE缺乏增强活化的小胶质细胞介导的炎症反应而加重NMO样星形胶质细胞损伤,提示ApoE对星形胶质细胞损伤有保护作用;3、ApoE缺乏导致小胶质细胞过度活化,TNF-α,N0等炎症因子的表达升高,导致炎症反应,可能是ApoE起到保护神经的作用的原因之一。
【关键词】:载脂蛋白E 视神经脊髓炎 脂多糖 星形胶质细胞
【学位授予单位】:广西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R744.52
【目录】:
- 个人简历3-5
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-9
- 前言9-11
- 技术路线图11-12
- 材料与方法12-17
- 结果17-20
- 讨论20-24
- 小结24-25
- 参考文献25-31
- 附录 中英文缩略词对照表31-33
- 综述33-61
- 参考文献49-61
- 致谢61-62
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,本文编号:880671
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