体内Period2基因调控X线照射后人胶质瘤细胞MDM2基因致凋亡的分子机制研究

发布时间：2017-09-29 18:02

  本文关键词：体内Period2基因调控X线照射后人胶质瘤细胞MDM2基因致凋亡的分子机制研究

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【摘要】：目的体内探究生物钟基因Period2的低表达在X线照射引起的胶质瘤凋亡过程中起到的作用及其分子调控机制。方法Period2-sh RNA慢病毒、Control-sh RNA非特异性干扰慢病毒各自感染人p53野生型人胶质瘤U343细胞后,sh RNA-Period2细胞组(Period2低表达)及对照病毒细胞组由puromycin筛选出;sh RNA-Period2细胞组、Control对照病毒细胞组及Control空白处理细胞组分别注射裸鼠颈后皮下,等到各组裸鼠成瘤的瘤块体积达到标准(1000mm3),给予10Gy X线照射3组胶质瘤并以此时为0时,分别于24h、48h、72h后,处死裸鼠并收集瘤体组织。TUNEL技术检测实验组凋亡情况、磷酸化H2AX含量检测实验组的DNA的损伤情况,使用q RT-PCR及Western Blot检测,X线照射后,实验各组中与DNA损伤-修复重要因子ATM、凋亡相关的p53、MDM2以及c-myc等的含量。结果细胞实验可见Period2-sh RNA慢病毒有效降低在人胶质瘤U343细胞中生物钟基因Period2的表达含量;X线处理后,在X线处理后的24h、48h、72h各个时间点,跟Control实验组比较,Period2低表达的实验组DNA损伤更轻,凋亡率更低,且随着时间的增加,Period2低表达组的DNA损伤和细胞凋亡都开始递增;随Period2表达量的下调,ATM表达水平减少,p53表达水平减少,而c-myc的表达水平增加,MDM2的表达水平增加。结论我们实验中人U343胶质瘤对X线的敏感性的降低是通过下调生物钟基因Period2的表达达到的;并通过调控ATM、p53、c-myc、MDM2等的表达减弱了ATM-p53-MDM2通路对凋亡的促进作用,抑制了胶质瘤的凋亡。
【关键词】：Period2 U343 X线照射 凋亡 MDM2
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.41
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 符号说明8-10
• 前言10-12
• 实验材料及方法12-28
• 结果28-38
• 讨论38-43
• 结论43-44
• 参考文献44-49
• 文献综述49-58
• 综述参考文献54-58
• 致谢58-59
• 研究生期间发表的论文59-60
• 个人简介60

【参考文献】

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1 王占祥,章翔,费舟,张剑宁,付洛安,刘卫平,贺晓生,王彦刚,梁景文,王西玲;外源性p21~(WAF1/CIP1)基因转染对人胶质瘤细胞生长和细胞周期的影响[J];第四军医大学学报;2003年22期

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本文编号：943416