HDAC4在大鼠坐骨神经损伤后的表达变化及意义

发布时间：2017-10-06 10:11

  本文关键词：HDAC4在大鼠坐骨神经损伤后的表达变化及意义

  更多相关文章： HDAC4 p21 增殖 施旺细胞

【摘要】：目的探讨坐骨神经夹伤后,HDAC4蛋白表达变化、细胞定位情况,以及HDAC4与坐骨神经损伤后施旺细胞增殖的关系,初步分析其在坐骨神经损伤和修复过程中的分子生物学作用。方法首先构建有效的SD大鼠坐骨神经夹伤模型,然后应用蛋白免疫印迹、免疫组织化学、免疫荧光等方法检测HDAC4在坐骨神经夹伤后的表达变化及细胞定位情况,并通过观察在施旺细胞体外培养模型中干扰HDAC4的表达后施旺细胞增殖情况,来初步分析HDAC4在坐骨神经损伤后施旺细胞增殖过程中的分子生物学意义。结果大鼠坐骨神经夹伤后,蛋白免疫印迹结果提示,HDAC4的表达显著增加,并且差别有统计学意义(P0.05)。夹伤后,坐骨神经组织中的HDAC4蛋白水平于12h开始缓慢上升,于5d左右达到最高,然后逐渐下降,在4W时恢复正常水平。HDAC4的免疫组织化学结果与蛋白免疫印迹实验结果一致,并提示HDAC4可能的细胞定位情况。免疫荧光双标实验结果证明,HDAC4主要表达于坐骨神经的施旺细胞中,部分表达于巨噬细胞,而较少表达在轴突中。同时HDAC4与增殖细胞相关抗原Ki-67的表达趋势一致,并且HDAC4与Ki-67存在施旺细胞共定位。在施旺细胞体外增殖模型中,HDAC4的表达随着施旺细胞的增殖不断增加,而p21的表达逐渐减少。流式细胞技术及细胞增殖分析提示,干扰HDAC4引起施旺细胞增殖受损,且p21的表达下调。结论大鼠坐骨神经夹伤后,HDAC4蛋白表达明显增加。HDAC4主要定位在施旺细胞中,蛋白表达变化趋势与Ki-67一致,并且与Ki-67有细胞共定位。HDAC4可能通过下调p21来促进施旺细胞增殖,从而参与坐骨神经损伤后的再生与修复过程。
【关键词】：HDAC4 p21 增殖 施旺细胞
【学位授予单位】：南通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R745.4
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 第一章 绪论10-13
• 1.1 课题来源、研究的目的和意义10-11
• 1.2 国内外研究概况11
• 1.2.1 国外研究概况11
• 1.2.2 国内研究概况11
• 1.3 论文的主要研究内容11-13
• 第二章 材料与方法13-22
• 2.1 研究资料及仪器设备13-16
• 2.1.1 研究对象13
• 2.1.2 主要仪器与试剂13-16
• 2.2 实验流程与方法16-22
• 2.2.1 建立大鼠坐骨神经夹伤模型16
• 2.2.2 取材16
• 2.2.3 标本处理及冰冻切片16-17
• 2.2.4 Western blot17-18
• 2.2.5 免疫组织化学染色18-19
• 2.2.6 免疫组织荧光19-20
• 2.2.7 免疫细胞荧光20
• 2.2.8 施旺细胞体外增殖模型构建20
• 2.2.9 流式细胞分析20
• 2.2.10 细胞增殖分析20-21
• 2.2.11 统计学处理21-22
• 第三章 结果22-31
• 3.1 HDAC4在坐骨神经夹伤后的蛋白表达变化22-23
• 3.2 HDAC4在坐骨神经夹伤后的免疫活性变化23-24
• 3.3 HDAC4在坐骨神经夹伤后的细胞定位24-26
• 3.4 HDAC4在坐骨神经夹伤后的细胞定位情况26
• 3.5 HDAC4与坐骨神经夹伤后细胞增殖的关系26-29
• 3.6 施旺细胞体外增殖模型中HDAC4的表达变化29-30
• 3.7 干扰HDAC4表达对施旺细胞增殖的影响30-31
• 第四章 讨论31-34
• 第五章 结论34-35
• 参考文献35-39
• 英文缩写词表39-41
• 综述41-49
• 综述参考文献45-49
• 在攻读硕士学位期间公开发表的论文49-50
• 在攻读硕士学位期间获得的荣誉50-51
• 致谢51

，

本文编号：982185