大鼠带瓣血管液氮冻存时间对其活性和组织中IGF-I水平的影响

发布时间：2017-10-11 12:11

  本文关键词：大鼠带瓣血管液氮冻存时间对其活性和组织中IGF-I水平的影响

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【摘要】：目的：观察、检测经液氮冻存不同时间大鼠带瓣血管的大体标本、管壁结构和细胞代谢情况及其组织中IGF-Ⅰ的分布和含量,研究带瓣管道的活性与IGF-Ⅰ之间的关系,提供一种评价带瓣管道活性的新思路。 方法：健康成年wistar大鼠60只,雌雄不限,体重150至250g,随机分为3组：空白对照组20只(A组),液氮冻存标本1个月20只(B组),液氮冻存标本3个月20只(C组)。采用腹腔内注射浓度为10%的水合氯醛麻醉,消毒并用无菌操作直接开胸取带瓣主动脉。将3组带瓣血管植入含有头孢西丁钠、林可霉素、两性霉素B、多粘菌素及万古霉素的M199培养基中37℃水浴6h。A组置入含含10%胎牛血清的M199培养基中孵育24h,计算检测其糖代谢率,B、C组经灭菌后置入含有10%胎牛血清和10%二甲基亚枫的M199培养基的冻存管中密封,经控制性阶段降温后分别置于-196℃液氮中冻存1个月、3个月。B、C组冻存结束后取出,放置于37℃水浴箱中快速升温后亦检测糖代谢率。3组标本经福尔马林固定后,石蜡包埋、切片,行HE染色和二步法免疫组化试剂盒染色,分别观察、统计各组标本的组织结构和细胞IGF-Ⅰ阳性染色。 结果：1、大体标本外观及形态：肉眼见3组带瓣大动脉均无溃烂、衰败及钙化灶,B、C两组带瓣主动脉的大体外观、形态无明显差异,而颜色较A组略微灰白。 2、葡萄糖代谢率：A组为3.812±0.4768mmol/L·24h,B组3.826±0.3495mmol/L.24hC组3.655±0.3736mmol/L.24h,3组数据之间比较差异无统计学意义(p0.05)。 3、组织结构：显微镜下观察A组标本病理切片可见管腔内被覆平整的单层扁平内皮细胞,胞核清晰,管壁中层有多层完整平滑肌细胞,胞外基质排列整齐,另见少许成纤维细胞。B组可见管腔一侧内皮细胞排列较为紧密、平整,中层血管平滑肌细胞轮廓清晰,排列整齐。C组可见管腔面内皮细胞轮廓清晰,无明显脱落,中层血管平滑肌细胞完整,较A组稍显疏松,未见排列紊乱及断裂现象。 4、免疫组化染色：3组标本均观察到较强阳性染色,可于细胞胞质中观察到深浅不等的棕黄色着色。‘成阳性染色细胞多集中分布于管壁中层的平滑肌细胞和部分成纤维细胞,内皮细胞亦可见染色。阳性率分别为：A组35%,B组30%,C组30%,3组数据之间比较差异无统计学意义(p0.05)。 结论：1、本实验采用目前主流的带瓣管道制备和保存方法可以在短时期内较好的保留组织和细胞的活性。 2、IGF-Ⅰ在带瓣主动脉中的内皮细胞、平滑肌细胞及成纤维细胞均有一定比例的阳性染色,提示其在为保留带瓣管道活性所发挥的作用方面有明确的细胞学证据。 3、由本实验的结果及IGF-Ⅰ的生物学作用,推测该分子可以作为评估带瓣管道活性的新指标,也为更为长久的保存带瓣管道活性提供了一条新思路。
【关键词】：带瓣管道 血管活性 IGF-I
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.52
【目录】：

• 主要英文缩写4-5
• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10
• 材料和方法10-17
• 结果17-20
• 讨论20-33
• 结论33-34
• 参考文献34-43
• 综述43-67
• 参考文献55-67
• 致谢67-68
• 研究生阶段发表论文68

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 范子荣,杨冬华,覃汉荣,徐重,邱庆林;IGF-I、IGF-II及其受体在肝癌和癌旁肝组织中的表达[J];癌症;2000年02期

2 徐志云,张宝仁;组织工程心脏瓣膜的研究现状与展望[J];第二军医大学学报;2003年03期

3 徐磊,黄庆恒,张鹏,任沪平,赵晏;液氮保存对人主动脉瓣组织细胞活力的影响[J];第四军医大学学报;2001年08期

4 侯广杰,韩涛,姚祖武;猪动脉瓣膜冷冻保存方法比较[J];郑州大学学报(医学版);2003年01期

5 余海彬,冯德广,赵根尚,初佩俊,蒋素娟,郭龙辉,李红卫,徐成阳;同种带瓣大动脉灭菌实验研究[J];医药论坛杂志;2005年04期

6 董雷,景在平,曹贵松,黄晟;奥曲肽抑制血管平滑肌细胞增殖及内源性IGF-I的表达[J];解放军医学杂志;2001年09期

7 薛炎,李伯君;同种瓣膜及带瓣血管免疫原性的研究进展[J];解放军医学杂志;2005年05期

8 黄伟;邓亮生;高钟镐;王玉丽;宋影文;郭凯琪;陈晓旋;冯来武;;人胰岛素样生长因子-Ⅰ基因P1启动子区域CA微卫星多态性对启动子活性的影响[J];解放军医学杂志;2010年09期

9 孙宗全,董念国,付平,杜心灵,蒋雄刚,蓝鸿钧;同种带瓣管道在复杂先心病外科治疗中的应用[J];临床心血管病杂志;1999年06期

10 薛亚梅;李坤;吕杰强;;IGF-1对细胞凋亡的抑制调控[J];生命科学;2007年01期

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 汪澎;蛋白激酶B（Akt）促进氧诱导的鼠视网膜新生血管形成的初步研究[D];中南大学;2011年

2 徐楠;纳米载体携载两性霉素B治疗隐球菌性脑膜炎的实验研究[D];第二军医大学;2006年

3 李秋泽;人细胞外基质包被猪去细胞瓣膜支架组织工程心脏瓣膜研究[D];第二军医大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前5条

1 李丽琴;人IGF-1对HIBD新生大鼠心肌细胞凋亡的影响[D];天津医科大学;2011年

2 王勋华;同种带瓣大动脉活性影响因素的实验研究[D];郑州大学;2003年

3 肖敏;活性同种带瓣主动脉补片重建F4右室流出道远期效果分析[D];青岛大学;2003年

4 纪志娴;深低温保存对大月龄胎儿带瓣血管细胞活性的影响[D];青岛大学;2005年

5 陈斌;三七总皂甙对骨髓基质细胞成骨分化的影响及机制研究[D];汕头大学;2010年

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本文编号：1012443