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生物可降解镁合金与肠道上皮细胞的生物相容性及其对肠道紧密连接的影响研究

发布时间:2017-10-11 21:40

  本文关键词:生物可降解镁合金与肠道上皮细胞的生物相容性及其对肠道紧密连接的影响研究


  更多相关文章: 可降解 镁合金 生物相容性 盲肠


【摘要】:目的:镁合金因其优良的机械性能以及可生物降解吸收等特点,在普外科胃肠吻合材料方面具有良好的应用前景。本课题主要研究镁合金与大鼠肠道上皮细胞的生物相容性及其对肠道紧密连接相关因子的影响。材料与方法:本课题主要包括体外细胞实验和体内动物实验。体内实验:将镁合金制成条柱状植入大鼠盲肠,术前及术后各时间点检测血生化指标;植入部位组织做常规病理和免疫组化检测;放射影像学评估镁合金降解情况。体外实验:不同浓度镁合金浸提液培养大鼠肠上皮细胞,通过MTT评估浸提液毒性;通过流式细胞仪检测细胞凋亡;通过Real-time PCR检测肠道紧密连接相关因子。结果:1.体内实验:镁合金植入后肝肾功能及血镁离子无明显影响;植入区组织没有明显的病理学改变,免疫组化显示镁合金上调组织ZO-1、Occludin和caspase-3表达。2.体外实验:MTT分析,镁合金浸提液在40%及以下浓度对肠上皮细胞毒性作用较弱,处于0-1级,对细胞的生长无明显影响;流式细胞分析,镁合金浸提液在40%浓度对肠上皮细胞有促凋亡作用。RT-PCR分析,镁合金浸提液上调ZO-1、Occludin与Claudins表达,保持细胞稳定性;40%浓度浸提液上调caspase-3表达促进细胞凋亡。结论镁合金植入大鼠盲肠后,肝肾功能及血镁离子浓度无明显影响,对肠道紧密连接相关因子表达有促进作用。低浓度合金浸取液对细胞毒性较弱,相对较高浓度合金浸提液促进细胞凋亡。基于镁合金可生物降解吸收,良好的力学性能及生物安全性等特点,我们认为其具有潜力适用于普外科胃肠道吻合手术。
【关键词】:可降解 镁合金 生物相容性 盲肠
【学位授予单位】:上海交通大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R656;R318.08
【目录】:
  • 中文摘要5-6
  • ABSTRACT6-9
  • 符号和单位说明9-10
  • 前言10-17
  • 参考文献14-17
  • 第一部分 镁合金体内实验17-35
  • 1 实验材料、试剂和主要仪器17-20
  • 1.1 实验动物17
  • 1.2 镁合金材料制备17-18
  • 1.3 主要实验试剂18-19
  • 1.4 主要实验仪器19-20
  • 2 实验方法20-22
  • 2.1 建立实验动物模型20
  • 2.2 动物实验相关评价指标检测20-21
  • 2.3 统计方法21-22
  • 3 实验结果22-32
  • 3.1 实验动物一般情况22
  • 3.2 血清学检测结果22-24
  • 3.3 盲肠组织病理学检查结果24-26
  • 3.4 盲肠组织免疫组化检测结果26-31
  • 3.5 合金降解影像学结果31-32
  • 4 讨论32-35
  • 第二部分 镁合金体外实验35-54
  • 1 实验材料、试剂和主要仪器35-38
  • 1.1 主要实验试剂35
  • 1.2 主要实验仪器35-36
  • 1.3 实验细胞培养36
  • 1.4 镁合金浸提液制备36-38
  • 2 实验方法38-41
  • 2.1 噻唑蓝(MTT)法检测镁合金浸提液对肠上皮细胞的毒性38
  • 2.2 流式细胞仪检测肠上皮细胞凋亡38-39
  • 2.3 Realtime-PCR检测ZO1、Occludin、Claudin和Caspases-3 基因表达39-40
  • 2.4 统计方法40-41
  • 3 实验结果41-51
  • 3.1 MTT法检测镁合金浸提液对肠上皮细胞的毒性结果41-43
  • 3.2 流式细胞仪检测细胞凋亡结果43-44
  • 3.3 RT-PCR检测相关基因表达结果44-51
  • 4 讨论51-54
  • 全文小结54-55
  • 参考文献55-60
  • 致谢60-61
  • 攻读学位期间发表的论文61

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本文编号:1014921

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