miR-210促进人牙周膜干细胞血管向分化作用的初步研究

发布时间：2017-10-12 01:36

  本文关键词：miR-210促进人牙周膜干细胞血管向分化作用的初步研究

  更多相关文章： 牙周膜干细胞 miR- 低氧诱导因子-α 血管内皮生长因子 慢病毒载体

【摘要】：目的构建miR-210的慢病毒载体(Lenti-miR-210-Luciferase),转染人牙周膜干细胞(h PDLSCs)后,检测成血管因子低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)在h PDLSCs的表达。方法分离培养h PDLSCs,并根据人miR-210基因(NC_000011.9)序列行引物设计及序列片段的PCR扩增,将目的基因PCR产物连接到载体p LVX-EGFP-3FLAG-EF1-Luc上。将目的基因PCR产物和目的载体用EcoRⅠ和XbaⅠ分别进行酶切,对质粒进行鉴定。采用LR重组系统构建慢病毒载体Lenti-miR-210-Luciferase(Lenti-Lac Z-Luciferase为对照组)。转染h PDLSCs后,通过q PCR和免疫组化法检测HIF-1α及VEGF的表达。结果通过对构建质粒克隆进行测序及酶切,证实Lenti-miR-210-Luciferase构建成功。Lenti-miR-210-Luciferase转染h PDLSCs,0、1、4、7、14 d后行q PCR检测,结果表明第4天HIF-1α和VEGF明显过表达,且持续到第14天。免疫组化结果显示,miR-210转染h PDLSCs后,抗HIF-1α和抗VEGF染色呈阳性,对照组呈阴性。结论成功构建了慢病毒载体Lenti-miR-210-Luciferase,并且miR-210具有促进h PDLSCs血管向分化的作用。
【作者单位】： 安徽医科大学附属口腔医院口腔颌面外科;
【关键词】： 牙周膜干细胞 miR- 低氧诱导因子-α 血管内皮生长因子 慢病毒载体
【基金】：安徽省科技厅重点课题(编号:10021303003)
【分类号】：R318.08
【正文快照】： 2015-05-08接收microRNAs(miRNAs)是一种内源性非编码的单链小分子RNA,长度为20~22个核苷酸,到目前为止,人类基因组中有超过1 400个miRNA序列(1424 miRbase:17.0)[1]。参与血管生成的内皮miR-NAs,也被称为angiomiRs[2],其中miR-210在细胞低氧时高表达,在组织缺血时,miR-210对

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王雪婷;罗明;;微小RNA-126在血管内皮细胞中的生物学功能[J];国际心血管病杂志;2014年01期

2 武成聪;李强;陈佳滨;茹嘉;蔡伟良;宁寅宽;;短期冻存兔骨髓间充质干细胞对其生物特性的影响[J];重庆医学;2014年04期

3 陈聪聪;程迅生;;骨髓间充质干细胞基因治疗骨缺损的研究进展[J];安徽医学;2014年04期

4 戴杰;陈现红;邓伟民;;机械振动对骨内细胞效应基础研究进展[J];中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志;2014年03期

5 夏冬景;华泽权;;3种烤瓷基底合金对人牙周膜干细胞增殖和骨相分化的影响[J];口腔医学研究;2014年01期

6 李琼;王佐林;;血管内皮祖细胞在构建组织工程骨中的研究进展[J];口腔颌面外科杂志;2013年06期

7 薛丹;许哲;孙江;冯延民;孙俊毅;;壳聚糖载药膜引导牙周组织再生的动物实验研究[J];临床口腔医学杂志;2014年08期

8 唐弈遥;周诺;;基因修饰在牵张成骨的研究进展[J];口腔颌面外科杂志;2014年05期

9 李瑜;刘媛媛;李帅;梁刚;张亚男;胡庆夕;;交联直写海藻酸盐水凝胶中空纤维的凝胶率与溶胀度[J];化工学报;2014年12期

10 李春明;舒适;尤艳利;李莎莎;周爽;;microRNAs与血管新生最新研究进展[J];辽宁中医杂志;2014年12期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 邹凯杰;高海s，

本文编号：1015933