采用三维细胞培养的牙本质屏障细胞毒性试验研究

发布时间：2017-10-12 07:19

  本文关键词：采用三维细胞培养的牙本质屏障细胞毒性试验研究

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【摘要】：目的:采用牙本质屏障法对4种常用的牙体充填材料和2种牙本质粘接剂进行细胞毒性试验,并与传统的滤膜扩散法进行比较,从而探讨牙本质屏障法的优势。方法:选取丁香油水门汀、磷酸锌水门汀、粘结用玻璃离子水门汀、复合树脂和两种自酸蚀粘接剂(REMI BOND与Adper Easy One)进行试验。牙本质屏障法中将L929细胞立体培养于聚苯乙烯网状支架上,切取人第三磨牙近髓牙本质片,用液压通透装置测量其通透性,选取试验区域内通透值相近的牙本质片进行试验。将长满细胞的网状支架置于细胞培养分隔灌注小室的"牙髓腔",牙本质片("牙髓面")紧贴网状支架放置其上,试验材料和对照与牙本质片的"牙合面"接触24 h后用MTT法测量细胞的光密度值(D540 nm),试验材料与阴性对照光密度值的百分比为材料的相对细胞存活率。使用非参数检验对结果进行统计学分析。滤膜扩散法中材料与有单层细胞生长的滤膜接触24 h后进行细胞染色、评级。结果:近髓牙本质片的平均通透值为0.293μL/(min·cm2·cm H2O)(1 cm H2O=0.098 k Pa)。牙本质屏障法中,丁香油水门汀降低细胞存活率至82%,REMI BOND与Adper Easy One分别降低细胞存活率至63%和54%,其余材料对细胞无损伤或损伤很低;滤膜扩散法中,光固化复合树脂为中度细胞毒性、牙科粘接用玻璃离子水门汀为轻度细胞毒性,其余材料均为重度细胞毒性;6种材料在牙本质屏障法中表现的细胞毒性明显低于滤膜扩散法的试验结果。结论:使用牙本质屏障法测得材料与三维培养的细胞接触后的细胞毒性比使用滤膜扩散法时的细胞毒性低,结果与临床实际相关性好。
【作者单位】： 北京大学口腔医学院·口腔医院口腔医疗器械检验中心口腔材料研究室口腔数字化医疗技术和材料国家工程实验室;北京市中西医结合医院口腔科;
【关键词】： 细胞毒性试验 牙本质通透性 细胞存活 牙本质黏结剂 细胞培养技术
【基金】：“十二五”国家科技支撑计划项目(2012BA122B03)资助~~
【分类号】：R783.1
【正文快照】： 评价口腔材料生物相容性的主要手段为体外试验、动物试验和临床试验[1],体外试验因具有简便快捷、重复性好且避免了对动物和人体的伤害等优点而被广泛应用。牙体充填材料和牙本质粘接剂为口腔材料的重要组成部分,目前常用的检测其细胞毒性的体外试验方法为间接接触试验(如琼脂

【共引文献】

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本文编号：1017382