藻酸钙凝胶三维细胞支架的制备与评价
发布时间:2017-10-22 12:33
本文关键词:藻酸钙凝胶三维细胞支架的制备与评价
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【摘要】:关节软骨损伤导致关节骨骼缺乏必要的保护,以至于人体一活动,关节直接发生剧烈硬性摩擦,而引发患者关节肿胀、疼痛、变形和骨刺增生等多种症状。然而,临床上人体软骨很难自行修复愈合。近年来,通过组织工程学方法研制良好的人工细胞支架替代材料成为研究热点。三维细胞支架材料具有生物相容性、良好的支撑性能和可降解的优势,支架材料的迅速发展可以为骨外科的诊疗效果带来极大的提升。藻酸钙凝胶具有良好的生物相容性和一定的机械强度,且具有三维立体多孔结构,能为细胞生长提供充分的附着空间,是一种理想的细胞支架材料。本文研究了藻酸钙凝胶三维支架材料的力学特性与氯化钙/藻酸钠的配比的关系,并提出采用低强度脉冲超声处理藻酸钙凝胶,基于超声空化效应增强藻酸钙凝胶孔隙率的新方法。为验证超声空化效应的作用,实验采用交联合成方法制备藻酸钙凝胶支架材料,测量力学特性、孔洞的联通性与孔隙率,并利用绿色荧光蛋白的表达评价细胞的增殖能力,采用免疫组化方法评价凝胶支架的实用性。结果表明,当氯化钙/藻酸钠的配比为3:5时,凝胶的机械强度和弹性较好,力学性能稳定,,为最佳配比参数。采用声压0.055 MPa的脉冲超声作用20分钟,凝胶支架的孔隙率可以有效提高;且细胞在该支架中生长状态良好,呈现团簇状生长趋势。藻酸钙三维细胞支架在作为关节软骨替代材料方面具有巨大的潜力,具有很深的研究意义和临床意义。
【关键词】:低强度超声 空化效应 组织工程支架材料 孔隙率
【学位授予单位】:南京大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:O648.17;R318.08
【目录】:
- 摘要4-5
- Abstract5-8
- 第一章 引言8-15
- 1.1 三维多孔细胞支架简介8-9
- 1.2 藻酸钙凝胶的性质及其应用9-11
- 1.3 医学超声原理与应用概述11-14
- 1.3.1 医学超声的物理原理11-12
- 1.3.2 医学超声的应用12-13
- 1.3.3 超声空化效应概述13-14
- 1.4 本文工作14-15
- 第二章 藻酸钙三维凝胶支架的制备与评价15-23
- 2.1 藻酸钙凝胶的制备15
- 2.2 藻酸钙凝胶物理学特性评价15-17
- 2.3 超声增强藻酸钙凝胶的孔隙率和通透性17-22
- 2.3.1 超声辐照实验系统17
- 2.3.2 扫描电镜测量藻酸钙凝胶的孔隙率17-18
- 2.3.3 不同的超声参数影响藻酸钙凝胶的孔隙率18-21
- 2.3.4 不同超声参数下凝胶的通透性改变21-22
- 2.4 小结22-23
- 第三章 超声增强细胞支架孔隙率的效果评价23-29
- 3.1 细胞培养与细胞-凝胶支架的制备23-24
- 3.2 超声增强凝胶支架的孔隙率,促进细胞生长24-28
- 3.2.1 荧光显微镜观察细胞数量24-25
- 3.2.2 CCK-8方法检测细胞活性25-26
- 3.2.3 软骨细胞的免疫组化检查26-28
- 3.2.4 统计学分析28
- 3.3 小结28-29
- 第四章 总结与展望29-30
- 参考文献30-35
- 硕士阶段发表论文35-36
- 致谢36-37
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