新型自组装短肽用于细胞三维实时监控和抗衰老研究

发布时间：2017-10-29 06:07

  本文关键词：新型自组装短肽用于细胞三维实时监控和抗衰老研究

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【摘要】：目的:采用新型自组装短肽GFS-15,模拟细胞外基质生长微环境(ECM)研究作为细胞三维培养材料的可行性,运用自组装短肽的特殊序列结构和理化性质将其连接在金电极传感器表,探索该短肽作为细胞三维培养实时监控材料的效果;在三维环境中构建细胞衰老模型,探索白藜芦醇抗衰老的作用过程与机制。方法:本文主要采用圆二色谱仪、原子力显微镜、刚果红染色等来探究手性自组装短肽GFS-15的二级结构、纳米形态和宏观形貌特征;循环伏安曲线、圆二色谱仪来检测浓度、时间、盐离子对它自组装过程的影响;通过研究分析三维和二维条件下不同实验组细胞的周期分布、细胞增殖、凋亡染色来研究该短肽抗衰老细胞层面的生物功能,qRT-PCR等分子技术研究该短肽抗衰老的机制过程。结果:该短肽GFS-15其二级结构为典型的β-折叠,原子力显微镜(AFM)显示其能够在离子条件下发生自组装,形成三维纳米纤维结构;48 h刚果红染色结果显示该短肽形态为透明水凝胶,可以作为细胞的三维培养材料;循环伏安曲线结果表明一定浓度的该短肽能结合在金电极表面形成膜结构,阻止电子的传递,其氧化还原峰值δEp减小;三维细胞实时监控实验,表面该短肽能够连接在金电极表面上形成三维支架,支持细胞生长。在2 h前,数据显示短肽能够快速的结合在金电极传感器上,形成三维支架;24 h后所形成的的支架依然稳定存在支持细胞生长;自组装短肽三维环境下白藜芦醇抗衰老研究结果显示,三维抗衰老组的细胞周期阻滞于G2期的细胞数约为11.89%,较二维抗衰老组降低约7.84%。结论:新型自组装短肽GFS-15在盐离子条件下能自组装形成稳定的三维纳米纤维支架,水溶液呈凝胶状可以作为细胞三维培养的理想材料;能与金电极传感器表面结合修饰形成稳定的三维支架,作为细胞三维培养实时监控的材料;在使用该短肽构建的三维环境下,运用白藜芦醇抗衰老效果更明显。
【关键词】：自组装短肽GFS-15 细胞三维培养 实时监控 抗衰老 电化学
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R318.08;TB383.1
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-14
• 第一部分：新型自组装短肽自组装效能以及电化学性能检测14-23
• 1 材料与方法14-16
• 2 实验结果16-22
• 3 讨论22-23
• 第二部分：新型自组装短肽GFS-15 的细胞的三维培养以及实时监控研究23-30
• 1 材料与方法23-25
• 2 结果25-28
• 3 讨论28-30
• 第三部分：新型自组装短肽三维体系下探索白藜芦醇抗衰老作用研究30-43
• 1 材料与方法30-35
• 2 结果35-40
• 3 讨论40-43
• 全文总结43-44
• 参考文献44-48
• 文献综述48-57
• 参考文献54-57
• 致谢57-58
• 攻读硕士学位期间发表的论文58

【参考文献】

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1 罗贤文;杜芳静;吴烨;高楼军;李晓霞;;基于金纳米粒子组装电化学DNA传感器检测p53抑癌基因的研究[J];分析化学;2013年11期

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本文编号：1111702