海藻酸钙敷料的体外止血效果及止血机制的研究

发布时间：2017-10-30 03:41

  本文关键词：海藻酸钙敷料的体外止血效果及止血机制的研究

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【摘要】：目的 探讨海藻酸钙敷料的体外止血效果及止血机制。方法抽取健康志愿者肘静脉血,与38 g/L的枸橼酸钠按1：9比例混匀。通过动态凝血实验评价海藻酸钙敷料的体外止血效果,设纳吸棉组、医用棉纱布组和空白组作为对照；将lml枸橼酸钠抗凝血滴加至5 mg海藻酸钙敷料上,室温静置2 min,经漂洗、固定后,扫描电镜下观察材料与血液的相互作用,设纳吸棉组和医用棉纱布组作为对照；分离红细胞并制成40%的红细胞悬液,取lml红细胞悬液滴加至5 mg海藻酸钙敷料上,静置15 s,用生理盐水洗掉未黏附的红细胞,加入lml生理盐水,室温下孵育1小时,扫描电镜下观察红细胞形态,设纳吸棉组与医用棉纱布组作为对照；分离红细胞,取沉淀红细胞lml于刻度试管中,分别用4m1不同浓度的(10 g/L,5 g/L,2.5 g/L)海藻酸钙敷料浸提液悬浮红细胞,观察30 min,60 min,120 min后红细胞沉降情况,然后分别混匀、涂片,显微镜下观察红细胞聚集程度,设生理盐水组作为空白对照；分离富血小板血浆(PRP), PRP分别与不同浓度的(10 g/L,5 g/L,2.5 g/L)海藻酸钙敷料浸提液于37℃共孵育,用流式细胞仪检测CD62P阳性血小板百分率,设生理盐水组作为空白对照；用Fluo-3, AM负载PRP,洗涤后加入不同浓度的(10 g/L、5 g/L、2.5 g/L)海藻酸钙敷料浸提液,37℃避光孵育,激光共聚焦显微镜下观察血小板内钙离子荧光。结果动态凝血实验表明,海藻酸钙敷料能明显加速内源性凝血进程,止血效果优于纳吸棉和医用棉纱布；海藻酸钙敷料与抗凝血接触后,扫描电镜下可见致密的纤维蛋白网形成,其中网罗大量血细胞,纳吸棉组与医用棉纱布组仅见少量红细胞及血小板黏附,未见纤维蛋白网形成；扫描电镜下可见,红细胞与海藻酸钙敷料相互作用后,细胞膜有伪足样改变,纳吸棉组与医用棉纱布组红细胞形态无明显变化；海藻酸钙敷料浸提液呈剂量与时问依赖性促进红细胞沉降,组问两两比较差异有显著性意义(P0.01)；显微镜下可见海藻酸钙敷料浸提液能促进红细胞叠连；海藻酸钙敷料浸提液呈剂量依赖性提高CD62P阳性血小板百分率,组问两两比较差异有显著性意义(P0.01)；随着藻酸钙敷料浸提液浓度的增加,血小板内钙离子荧光强度增加。结论海藻酸钙敷料止血效果良好,可通过释放钙离子、引起红细胞聚集、活化红细胞和血小板等多个环节促进血液凝固,说明该敷料在止血领域有极高的临床使用价值。
【关键词】：海藻酸钙敷料 枸橼酸钠抗凝血 钙离子 红细胞 血小板
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R318.08
【目录】：

• 摘要2-4
• abstract4-8
• 引言8-10
• 第一章 材料与方法10-15
• 1.1 实验材料10-11
• 1.1.1 主要材料试剂10
• 1.1.2 主要仪器10-11
• 1.2 实验对象11
• 1.3 血液和浸提液的制备11
• 1.3.1 枸橼酸钠抗凝血的制备11
• 1.3.2 海藻酸钙敷料浸提液的制备11
• 1.4 实验方法11-15
• 1.4.1 动态凝血实验11-12
• 1.4.2 藻酸钙敷料与枸橼酸钠抗凝血的相互作用12
• 1.4.3 藻酸钙敷料对红细胞的影响12-13
• 1.4.3.1 红细胞形态12
• 1.4.3.2 红细胞沉降12-13
• 1.4.3.3 红细胞叠连13
• 1.4.4 对血小板的影响13
• 1.4.4.1 血小板CD62P13
• 1.4.4.2 血小板内钙离子浓度13
• 1.4.5 统计学分析13-15
• 第二章 实验结果15-23
• 2.1 动态凝血实验15-16
• 2.2 与枸橼酸钠抗凝血的相互作用16-17
• 2.3 对红细胞的影响17-20
• 2.3.1 对红细胞形态的影响17-18
• 2.3.2 对红细胞沉降的影响18-19
• 2.3.3 对红细胞聚集的影响19-20
• 2.4 藻酸钙敷料 提液对血小板的影响20-23
• 2.4.1 对血小板CD62P的影响20-21
• 2.4.2 血小板内钙离子浓度的影响21-23
• 第三章 讨论23-26
• 结论26-27
• 参考文献27-30
• 综述30-45
• 综述参考文献37-45
• 攻读学位期间的研究成果45-46
• 致谢46-47

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本文编号：1115983