磷酸盐梯度胶原材料的制备及其生物相容性的初步研究

发布时间：2017-11-04 23:37

  本文关键词：磷酸盐梯度胶原材料的制备及其生物相容性的初步研究

  更多相关文章： 界面组织 磷酸盐梯度的胶原材料 肌腱干细胞 生物相容性

【摘要】：前交叉韧带-骨（ACL-to-Bone）界面组织包括四种不同的组织区域：韧带，非矿化的界面组织，矿化的界面组织，和骨。不同的组织区域含有不同的材料成分和细胞。在韧带区域，成纤维细胞处于由胶原Ⅰ和胶原Ⅲ组成的基质中，而非矿化的界面组织区域，，卵圆型的软骨细胞处于由胶原Ⅱ和蛋白聚糖组成的区域。矿化的界面组织含有肥大的软骨细胞。软骨下骨是由成骨细胞、骨细胞和破骨细胞及胶原Ⅰ基质组成。 界面组织工程需要梯度的支架材料和可分化为不同类型细胞的种子细胞。梯度生物材料在化学组成、结构、力学和生物分子等各种特征中具有各向异性。梯度生物材料已经成为生物医学领域特别是组织工程中必不可少的研究热点。目前，各种各样天然或合成的生物材料已被用于制备组织支架材料，并且被广泛应用于各领域。水凝胶具有设计灵活、水合性、粘性等特性，能很好的模仿体内ECM性质，是界面组织工程理想的材料。在界面组织修复和再生过程中，细胞在不同区域行使不同的功能，因此细胞的选择非常重要。来自肌腱组织的成体干细胞-肌腱干细胞除具有干细胞的通性，还具有增殖速度快、能高效向软组织细胞分化的能力，是界面组织工程种子细胞的理想选择。 本课题主要包括制备磷酸盐梯度的胶原材料、肌腱干细胞的分离和鉴定、磷酸盐梯度的胶原材料的生物相容性。 主要方法与结果如下： ①鼠尾胶原Ⅰ的提取、纯化和鉴定：依醋酸提取法制备鼠尾胶原初提物，盐析、半透膜纯化、冷冻干燥得到银白色蓬松状鼠尾胶原。采用SDS-PAGE凝胶电泳考马斯亮蓝染色法、红外光谱分析（FITR）鉴定确定所得为高纯度鼠尾胶原Ⅰ。 ②磷酸盐鼠尾胶原梯度材料的制备：采用梯度溶液矿化法制备磷酸盐梯度胶原材料。扫描电镜分析可知，磷酸钙混合物与鼠尾胶原Ⅰ结合，有明显界面差异，上层磷酸钙混合物沉淀颗粒较少，而下层较多。 ③磷酸盐鼠尾胶原梯度材料与大鼠生物相容性分析：以SD大鼠为移植载体，HE染色分析材料降解属性，DAPI染色考察材料细胞浸润。结果可知：梯度材料移植两周后没有完全降解，大量细胞浸入材料内部。 ④肌腱干细胞（TSPCs）的分离、培养、鉴定：取SD大鼠跟腱组织，Ⅰ型胶原酶消化、选取克隆团，经三向分化、流式细胞术检测干细胞表面标志物，确定该细胞为肌腱干细胞。⑤磷酸盐鼠尾胶原梯度材料肌腱干细胞相容性分析：将肌腱干细胞种植于磷酸盐鼠尾胶原梯度材料中，两周内取时间点DAPI染色观察，肌腱干细胞在材料内生长良好。 综上所述，制备的磷酸盐鼠尾胶原梯度材料具有特异的微细结构、良好的生物相容性。分离得到的肌腱干细胞（TSPCs）结合上述梯度材料可为界面组织工程进一步研究提供研究基础与参考。
【学位授予单位】：重庆大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.08

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张元中;吴旭;付小兵;冯长江;张子良;;体外条件下蜕皮甾酮对大鼠脐带间充质干细胞增殖的实验研究[J];广东医学;2011年09期

2 何红燕;崔冰琳;冯学永;肖平;林晓波;蒋学武;罗敏洁;马廉;;人脐带间充质干细胞分化为神经细胞的形态学改变[J];国际输血及血液学杂志;2006年06期

3 王靖;张朝跃;;早期制动对髌骨-髌腱连接点损伤修复中巨噬细胞聚集的影响[J];广东医学;2013年18期

4 常胜合;徐立;李敬阳;孙威;王甲水;许桂莺;孙佩光;吴琼;金志强;舒海燕;;提高香蕉胚性愈伤诱导成功率的可能途径[J];安徽农业科学;2013年19期

5 阿布都热合曼·吐尔逊;迪丽努尔·塔力甫;阿依努尔·达吾提;;羊骨炭对Pb(Ⅱ)、Cr(Ⅵ)、Cd(Ⅱ)吸附性能研究[J];广东化工;2013年19期

6 姜英浩;张菊;卢兹凡;;干细胞伦理之争的“终结者”——谈诺贝尔生理学与医学奖获得者山中伸弥[J];医学争鸣;2013年05期

7 徐丽萍;龙大宏;校对;;诱导多能干细胞及其在神经再生医学的应用前景[J];解剖学研究;2013年05期

8 Jian Shu;Hongkui Deng;;Lineage Specifers:New Players in the Induction of Pluripotency[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2013年05期

9 Xiao-Bing Zhang;;Cellular Reprogramming of Human Peripheral Blood Cells[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2013年05期

10 Wenwen Jia;Wen Chen;Jiuhong Kang;;The Functions of MicroRNAs and Long Non-coding RNAs in Embryonic and Induced Pluripotent Stem Cells[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2013年05期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 王沥浩;王文慧;张雪;李海燕;杨晶;;胶原蛋白功能概述[A];2013年中国药学大会暨第十三届中国药师周论文集[C];2013年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 赵雯红;IL-12基因修饰人脐带间充质干细胞抗卵巢癌体内外作用的研究[D];河北医科大学;2011年

2 于靓霞;间充质干细胞输注治疗重症肌无力的实验研究[D];北京协和医学院;2011年

3 沈炜亮;肌腱干细胞和间质细胞衍生因子复合蚕丝—胶原支架促进肌腱再生的研究[D];浙江大学;2011年

4 周晓东;胎盘基质干细胞骨向分化及生物反应器构建骨组织的修复效果[D];第四军医大学;2005年

5 金善;人脐血间充质干细胞治疗血管性痴呆的实验研究[D];第二军医大学;2006年

6 马廉;人脐带间充质干细胞的生物学特性及神经分化研究[D];汕头大学;2005年

7 孙宇;糖尿病患者骨髓间充质干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的研究[D];山东大学;2007年

8 刘沉涛;骨髓间充质干细胞向神经细胞诱导分化中免疫性发育的实验研究[D];中南大学;2007年

9 徐洁;神经节苷脂GD2：一个分离和鉴定间充质干细胞的新型表面分子[D];中国协和医科大学;2009年

10 廖文斌;人脐带间充质干细胞移植治疗脑血管疾病的实验研究[D];中国协和医科大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 田毅;人脐带Wharton's jelly间充质干细胞的生物学特性以及其与脑肿瘤干细胞共培养的实验研究[D];郑州大学;2010年

2 高杨;人脐血间充质干细胞对肝癌转移的影响及机制的探讨[D];昆明医学院;2011年

3 史鹏飞;IL-12基因修饰人脐带间充质干细胞抗卵巢癌SKOV3细胞作用的体外研究[D];河北医科大学;2011年

4 习旭涛;人脐带间充质干细胞初始接种密度对成骨诱导分化影响的初步研究[D];中南大学;2011年

5 庞云;人脐带胶质间充质干细胞的分离培养与特性研究[D];内蒙古农业大学;2011年

6 何志裕;人脐带血间充质干细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死的实验研究[D];广州医学院;2010年

7 邓长卿;脐带间充质干细胞生物学特性及功能研究[D];苏州大学;2011年

8 王英梅;猪皮纤维精细结构及其在酶作用下破坏的表征[D];四川大学;2002年

9 刘瑞敏;hTERT-逆转录病毒载体构建及其介导的脐血间充质干细胞基因转移研究[D];郑州大学;2005年

10 樊志刚;脐血干细胞移植对帕金森大鼠旋转行为以及纹状体多巴胺含量的影响[D];郑州大学;2006年

本文编号：1141671