Ⅱ型胶原糖胺聚糖复合支架对hUCMSCs成软骨诱导的实验研究

发布时间：2017-11-05 09:28

  本文关键词：Ⅱ型胶原糖胺聚糖复合支架对hUCMSCs成软骨诱导的实验研究

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【摘要】：目的探讨以人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)作为软骨组织工程种子细胞,Ⅱ型胶原复合糖胺聚糖支架材料作为细胞载体及其细胞-支架复合体成软骨的可行性。方法制备Ⅱ型胶原复合糖胺聚糖多孔支架,电镜观察测定支架材料的孔径、孔隙率和亲水性,对支架材料进行相应的组织学分析。培养鉴定P3代的hUCMSCs,将hUCMSCs混悬液接种到Ⅱ型胶原复合糖胺聚糖支架上,不加诱导剂进行培养,3周后取出样品行甲苯胺蓝、番红精O染色,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色及扫描电镜观察。结果第3代hUCMSCs高度表达CD29、CD105等间充质细胞标志,几乎不表达CD34等内皮细胞、造血细胞标志。Ⅱ型胶原复合糖胺聚糖支架材料呈白色多孔泡沫状,孔隙率为(91.8±2.17)%,孔径110~230μm,分布均匀,相互贯通。吸水膨胀率为(213.71±1.31)%,亲水性良好。甲苯胺蓝、番红精O及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色呈阳性。细胞-支架复合体在培养过程中可观察到有软骨样组织形成并逐步增多,甲苯胺蓝、番红精O及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均呈阳性,电镜观察显示细胞在支架上增殖活跃,与材料黏附紧密,可见软骨样细胞及其周围大量交错连接的胶原纤维。结论 hUCMSCs与Ⅱ型胶原复合糖胺聚糖支架材料复合,可在体外不经诱导而初步构建组织工程软骨,为软骨损伤的修复奠定了一定的实验基础。
【作者单位】： 昆明医科大学;成都军区昆明总医院骨科;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81360274) 第57批博士后科学基金面上资助项目(2015M572718) 云南省应用基础研究自筹经费项目(2014F2106) 成都军区昆明总医院院管项目(2012YG12)
【分类号】：R68;R318.08
【正文快照】： 因创伤、肿瘤、结核及痛风等代谢性疾病引起软骨缺损,从而导致的关节疼痛、关节活动受限,是骨科亟待解决的难题之一。目前,临床上常见的治疗方法如自体软骨膜及骨膜移植、自体/异体骨软骨移植等修复的软骨大多为纤维软骨,耐磨性差[1],在生物和机械性能上与透明软骨有着很大差，

本文编号：1143629