成骨诱导后的ADSCs的抗原性及对骨缺损修复的实验研究

发布时间：2017-11-10 04:27

  本文关键词：成骨诱导后的ADSCs的抗原性及对骨缺损修复的实验研究

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【摘要】：目的 探讨成骨诱导后的脂肪来源间充质干细胞(Adipose tissue-derived MSCs，ADSCs)的抗原性及对骨缺损修复的影响。 方法 取诱导成骨后的WKY大鼠的ADSCs,骨髓间充质干细胞(Bone marrow stemcell,BMSCs)与羟基磷灰石支架(Hydroxyapatite,HA)构成ADSCs/HA、BMSCs/HA细胞支架复合体，植入Wistar大鼠桡骨缺损区，Wistar大鼠随机分为四组：对照组(仅骨缺损)、实验A组(支架移植组)、实验B组(BMSCs/HA移植组)、实验C组(ADSCs/HA移植组)，每组又分为1、2、4、8W四个亚组(n=5)，分别于植入后1、2、4、8W对骨缺损区进行放射线检测，HE染色光镜观察，，免疫组化检测IL-2、TGF-β、TNF-α、CD4、CD8，采用ELISA法检测术后2、4周脾细胞培养液上清IL-2、TGF-β、TNF-α的含量。 结果 (1)光镜下观察：B、C两组于术后2W时，可见较多的纤维组织充填，4W有类骨质形成及骨陷窝出现，8W骨细胞增多，骨小梁明显；对照组及A组于术后2W缺损区域周围有少量结缔组织长入，缺损修复晚于B、C两组。炎细胞计数：各时间点A、B、C组与对照组比较有显著差异(P0.05)，各组炎细胞计数随着移植周数增加而降低；(2)免疫组化显示：术后2W时，A、B、C三组于骨缺损区可见少量CD8、CD4、IL-2、TGF-β1、TNF-α阳性表达细胞，组间表达无显著差异(P0.05)，但与对照组比较差异显著；术后8W，各组阳性表达降低；(3)ELISA显示：术后2W，脾细胞上清中IL-2、TGF-β1、TNF-α蛋白含量A、B、C组组间比较无显著差异，与对照组比较有显著差异，4W各组蛋白含量均降低，对照组与其他三组比较有显著差异；(4)放射线观察：骨缺损区可见B、C两组术后2W两端有少量骨痂形成，术后4W两断端有大量模糊骨痂形成，术后8W新骨密度增高；对照组术后1W未见骨性修复，术后8W未见骨性修复最后形成骨不连；A组术后8W支架周围有少量骨痂形成。组织学评分对照组和A组与B、C两组比较差异显著(P0.05)，修复效果B、C两组优于对照组和A组。 结论 成骨诱导后的ADSCs的抗原性不明显，移植后可对大鼠桡骨缺损修复，且修复效果优于支架移植组。
【学位授予单位】：辽宁医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.08

【参考文献】

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本文编号：1165084