新型复合骨材料阿伦磷酸钠—羟基磷灰石—壳聚糖对BMSCs增殖的影响

发布时间：2017-11-18 03:23

  本文关键词：新型复合骨材料阿伦磷酸钠—羟基磷灰石—壳聚糖对BMSCs增殖的影响

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【摘要】：目的：利用一种我们研制的新型复合骨材料阿伦膦酸钠-羟基磷灰石-壳聚糖(Alendronate-chitosan-hydroxyapatite、ALN/HA/CS),检测它对骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cells、BMSCs)增殖的影响。方法：利用新型复合骨材料,研究它对BMSCs增殖的影响。我们设计对照组为羟基磷灰石-壳聚糖复合材料,实验组为阿伦膦酸钠-羟基磷灰石-壳聚糖复合材料,并通过如下实验检测新型材料的功效：培养兔骨髓间充质干细胞原代细胞并进行传代培养；在传至第三代时将骨髓间充质干细胞与复合支架共培养,扫描电镜观察细胞与支架粘附生长情况,同时利用MTT法检测复合支架对骨髓间充质干细胞增殖影响；利用新型复合支架材料与骨髓间充质干细胞共培养,观察新型材料对BMSCs成骨诱导的效果。在成骨诱导第14天后将支架细胞进行贴壁伸展,并进行碱性磷酸酶染色；在成骨诱导的第3、7、14天,分别吸取上清液进行碱性磷酸酶活性分析；在成骨诱导第21天,将支架细胞洗脱爬片,待贴壁伸展后进行茜素红染色；在成骨诱导第7、14、21天吸取上清液,ELASA检测BGP蛋白表达,在成骨诱导第3、7、14天吸取上清液,ELASA检测Ⅰ型胶原蛋白表达。结果：1、兔骨髓间充质干细胞与复合支架共培养,扫描电镜观察可观察到细胞呈不规则形状,细胞伸展并与材料表面黏附,新型复合材料阿伦膦酸钠-羟基磷灰石-壳聚糖与传统材料羟基磷灰石-壳聚糖无明显区别。MTT检测显示,新型材料组骨髓间充质干细胞增殖优于传统材料组,差异具有统计学意义(P0.05)。成骨诱导14天后,新型材料组的ALP染色阳性表达明显高于传统材料组。成骨诱导3、7、14天,新型材料组ALP活性水平均明显高于传统材料组,差异具有统计学意义(P0.05)。成骨诱导21天,新型材料组茜素红阳性表达优于传统材料组。成骨诱导7天后,新型材料组BGP分泌与传统材料组无明显区别。成骨诱导14、21天,新型材料组BGP分泌量明显高于传统材料组,差异具有统计学意义(P0.05)。成骨诱导3、7、14天,新型材料组工型胶原蛋白分泌量明显高于传统材料组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论：1、相比于羟基磷灰石-壳聚糖,新型复合材料阿伦膦酸钠-羟基磷灰石-壳聚糖可有效促进骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化。2、新型复合材料阿伦膦酸钠-羟基磷灰石-壳聚糖复合材料可以成为比传统材料羟基磷灰石-壳聚糖更具优势的骨修复理想组织工程材料。
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R318.08

【参考文献】

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本文编号：1198392