基于纳米材料的DNA生物荧光探针的研制及其在细胞成像中的应用

发布时间：2017-12-05 04:24

  本文关键词：基于纳米材料的DNA生物荧光探针的研制及其在细胞成像中的应用

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【摘要】：随着环境不断恶化,人类患癌症的几率不断增加。在医学中发展肿瘤细胞的高灵敏检测方法是实现癌症早期诊断治疗的重要手段,在癌症的临床医疗领域,高效低毒副作用的靶向抗癌药物配合极早诊断,是目前世界公认的癌症治愈的最佳方案。本文综合DNA传感器,纳米技术,成像技术设计了特异性识别Ramos细胞的探针,在灵敏度和特异性方面取得了不错的效果。本论文研究内容如下： 1.设计了一种基于滚环扩增技术的双色法来对靶DNA进行可视化检测的方法。实验中使用绿色和橙色的两种颜色的量子点分别标记滚环反应的产物。由于在底物存在下滚环反应可以一直进行下去,所以滚环反应会产生很长的DNA链,以此接上量子点后,即可以实现信号的放大,进而可视化的检测靶DNA。体系中绿色量子点的引入是作为实验的参照点,橙色的量子点则是作为检测靶DNA的产物。这种双色信号法检测靶DNA的方法可以避免仅使用一种量子点而造成的单一信号难分辨干扰信号的麻烦。双色信号法可以实现靶DNA的可视化检测,并且也为单分子DNA的可视化检测提供了依据,有待于更加深入的研究。 2.研制了一种以介孔二氧化硅为载体,结合适体DNA和CdTe量子点的介孔二氧化硅@量子点复合荧光探针。该方法成功用于Ramos细胞的荧光成像检测。经过氨基功能化的介孔二氧化硅可以结合大量的荧光量子点以及适体DNA链,所以该探针具有很高的荧光强度以及特异性识别能力。将适体DNA序列换为其他生物单元识别序列,则可以实现其他的检测目的。介孔二氧化硅具有的孔道结构以及良好的生物相容性,也决定了它可以作为药物的载体。本实验对于肿瘤细胞的早期诊断和治疗提供了一定的依据。 3.开展了基于自组装CdTe量子点@AnnexinV-DNA纳米线荧光探针的研究,该探针基于肿瘤细胞DNA适体设计了能够与靶标肿瘤细胞特异性结合的序列,从而实现对肿瘤细胞的特异性检测。更关键的是利用该探针的结构特点,实现了肿瘤细胞受药生理变化的指示。因此该探针不仅能够进行肿瘤细胞成像检测,而且可以同时对正常、凋亡、坏死三种细胞生理状态进行指示。经过进一步的完善和结构优化,该探针的研制可对新型多功能生物成像探针的开发产生一定的启示。
【学位授予单位】：青岛科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.08;O657.3

【参考文献】

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本文编号：1253559