细菌纤维素在组织工程半月板支架的基础研究

发布时间：2017-12-20 15:31

  本文关键词：细菌纤维素在组织工程半月板支架的基础研究　出处：《安徽医科大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：研究目的：膝关节半月板损伤是一种常见的疾病,可由外伤,关节退化等因素引起,膝关节半月板切除后可导致软骨退变引起骨性关节炎；由于半月板的来源有限,组织工程技术的发展,能够为半月板损伤切除后的修复和再造开辟了新的方法；利用该技术构建与原有功能类似的半月板在防治半月板切除后的并发症中有重要意义。在膝关节半月板的组织工程中,支架在半月板的构建中起决定性作用,纤维软骨细胞的附着,增殖,分化和新陈代谢都离不开支架。因此,支架材料是半月板组织工程研究的一个重点。本课题以实验研究探索细菌纤维素支架作为半月板移植组织工程的可行性。研究方法：将兔骨髓间充干细胞及乳兔半月板纤维软骨细胞分离培养,用乳兔半月板纤维软骨细胞特异性抗体Collagen type Ⅱ来鉴定所制备的细胞是否为兔半月板纤维软骨细胞,采用CD29和CD44抗体以及羊抗兔IgG-FITC二抗对乳兔骨髓间充质干细胞流式鉴定；将细菌细菌纤维素支架浸泡于纤维软骨细胞培养基对半月板细胞进行培养并进行MTT检测纤维软骨细胞生长情况,鉴定支架对细胞是否具有安全性；乳兔半月板纤维软骨细胞、兔骨髓间充质干细胞与支架共培养电镜观察细胞生长情况,利用RT-PCR检测兔骨髓间充干细胞和兔半月板纤维软骨细胞共培养后相关基因mRNA表达水平及HE染色,明确细菌纤维素组织工程半月板与两种干细胞的组织相容性；将细菌纤维素支架植入兔子的臀部,定期收集血液进行免疫组化检测CD68表达量测量支架体内的毒理反应,ELISA检测血液中炎症因子鉴定支架对体内的炎性反应,取出臀部支架标本进HE染色观察局部的修复及周围范围。结果：当骨髓间充质干细胞和半月板纤维软骨细胞共培养时,骨髓间充质干细胞能够被诱导形成半月板纤维软骨细胞；将浸泡过细菌纤维素支架的培养基培养细胞对细胞没有明显的干扰作用,在电镜观察及特异的细胞免疫组化能够证明细胞在支架上的贴附和生长；植入兔子臀部体内的支架,并没有明显引起炎症因子的变化,而且支持组织的修复。结论由于细菌纤维素支架对细胞的安全性及对体内的无免疫反应,骨髓间充干细胞及半月板纤维软骨细胞在细菌纤维素支架上的相容性,并且两种细胞表现出不同的生长性,证明细菌纤维素支架对在半月板移植组织工程具有很大可行性,对半月板移植组织工程实验研究具有重要的意义,具有更贴近于临床的目的。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R684;R318.17

【参考文献】

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本文编号：1312614