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SATB2促进BMP9诱导间充质干细胞的成骨分化

发布时间:2017-12-22 00:18

  本文关键词:SATB2促进BMP9诱导间充质干细胞的成骨分化 出处:《重庆医科大学》2016年硕士论文 论文类型:学位论文


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【摘要】:目的:研究特异序列AT结合蛋白2(Special AT-rich Sequence-Binding Protein 2,SATB2)对骨形态发生蛋白9(Bone Morphogenetic Proteins 9,BMP9)诱导的间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells)的影响,并简单探讨这种影响可能涉及的机制。方法:首先,用重组腺病毒Ad-BMP9处理C2C12、C3H10T1/2、MEFs细胞,分别用RT-PCR和Western Blot检测BMP9对内源性SATB2表达的影响;构建过表达SATB2的重组腺病毒Ad-SATB2,Western Blot验证Ad-SATB2的效果;其次,碱性磷酸酶(ALP)活性定量分析及染色和茜素红染色分析SATB2对BMP9诱导间充质干细胞的早期成骨分化指标ALP和晚期成骨分化指标钙盐沉积的影响;再次,Q-PCR或Western Blot检测SATB2对BMP9诱导的靶基因Id1、Id2、Id3以及转录因子Runx2、Osterix、Dlx5等成骨相关基因的影响;最后,荧光素酶报告实验检测SATB2对BMP9诱导的磷酸化Smad1/5/8的影响。结果:首先,BMP9可以促进SATB2的表达,Ad-SATB2能在间充质干细胞中成功表达;其次,SATB2可以诱导间充质干细胞的ALP活性和钙盐沉积,且能明显增加BMP9诱导的间充质干细胞的ALP活性和钙盐沉积;再次,SATB2可以诱导Id1、Id2、Id3以及转录因子Runx2、Osterix、Dlx5等成骨相关基因的表达,且能加强BMP9诱导的Id1、Id2、Id3以及转录因子Runx2、Osterix、Dlx5等成骨相关基因的表达;最后,SATB2诱导Smad1/5/8的调控活性,且能增强BMP9诱导的Smad1/5/8的调控活性。结论:SATB2可以诱导间充质干细胞的成骨早期和晚期分化,以及Id1、Id2、Id3、Runx2、Osterix、Dlx5基因的表达;SATB2能加强BMP9诱导的间充质干细胞的成骨早期和晚期分化,以及Id1、Id2、Id3、Runx2、Osterix、Dlx5基因的表达;SATB2可以通过调控Smad1/5/8的转录活性来加强BMP9诱导的间充质干细胞的成骨分化。
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R318.08;R687

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本文编号:1317728

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