复合N-乙酰半胱氨酸（NAC）的丝素蛋白磷酸钙骨水泥的细胞相容性及成骨性能研究

发布时间：2017-12-29 05:19

  本文关键词：复合N-乙酰半胱氨酸（NAC）的丝素蛋白磷酸钙骨水泥的细胞相容性及成骨性能研究　出处：《苏州大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:制备负载N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)的丝素蛋白磷酸钙骨水泥(α-Tricalcium Phosphate/Silk Fibroin-N-acetyl cysteine,α-TCP/SF-NAC),探讨其缓释特性,细胞相容性及成骨性能。方法:向丝素溶液中加入不同体积的1M NAC溶液配置成含有不同浓度NAC的6%SF(SF-NAC10mM,NAC1;SF-NAC25mM,NAC2)固化液,将α-TCP粉末与固化液按1g/0.4ml的比例混合制备α-TCP/SF-NAC骨水泥。使用紫外分光光度仪对α-TCP/SF-NAC骨水泥药物释放情况进行评估。采用骨水泥浸提液与rBMSCs共培养,以MTS法、乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)活性检测、免疫荧光染色检测复合骨水泥的细胞毒性。采用骨水泥与rBMSCs共培养,检测碱性磷酸酶(Alkline Phosphatase,ALP)活性及RT-PCR检测成骨标志性蛋白Col-Ⅰ、ALP和转录因子Runx2的相对表达量,评价复合骨水泥成骨活性。结果:NAC可从负载NAC的丝素蛋白磷酸钙骨水泥(α-TCP/SF-NAC)中缓慢释放,释放呈浓度依赖性。3w时NAC1及NAC2的释放率分别为45.25±2.55%及59.15±5.73%。细胞在α-TCP/SF-NAC骨水泥浸提液中生长良好,外形无明显异常,无明显细胞毒性。rBMSCs在α-TCP/SF-NAC骨水泥表面成骨诱导3天后,NAC1组和NAC2组细胞培养基上清ALP活性高于对照组(p0.05),其中NAC2组显著高于其他各组(p0.01)。在诱导培养后,NAC1组及NAC2组细胞的Col-Ⅰ、ALP与Runx2的相对表达量高于对照组,且随培养时间的延长逐渐增高。结论:负载不同浓度NAC的丝素蛋白磷酸钙骨水泥能够缓慢持续释放NAC。负载不同浓度NAC的丝素蛋白磷酸钙骨水泥无细胞毒性,不影响细胞增殖。负载不同浓度NAC的丝素蛋白磷酸钙骨水泥能够提高rBMSCs外分泌的碱性磷酸酶活性,并促进成骨特异性蛋白及转录因子的表达。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R318.08;R687

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本文编号：1348963