兔骨髓间充质干细胞在藻酸锶凝胶中体外三维培养的实验研究

发布时间：2018-02-16 10:13

  本文关键词： 骨髓间充质干细胞 藻酸锶 组织工程　出处：《中国矫形外科杂志》2014年07期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：[目的]观察兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)于藻酸锶凝胶中体外三维培养的形态与活性变化,为藻酸锶凝胶复合干细胞应用于骨组织工程提供理论依据。[方法]分离培养原代兔BMSCs并扩增,取第3代BMSCs以细胞密度为5×105个/ml复合于藻酸锶凝胶中三维培养,每日于倒置相差显微镜下观察细胞形态,在不同时间点对其进行Live/Dead染色测细胞存活,CCK-8检测细胞增殖,并用扫描电镜观察凝胶的超微结构及细胞于凝胶上的黏附情况。[结果]藻酸锶凝胶质软、透明、渗透性较好;BMSCs接种于藻酸锶凝胶中初始形态为圆形、呈悬浮生长,后细胞逐渐贴壁生长并呈星形或多角形;接种第1 d和第14 d凝胶中活细胞率分别为(88.61±4.08)%和(92.16±2.10)%,两者间无显著统计学差异(P0.05);第4、7、10、13 d时二维培养组中OD值显著高于三维培养组(P0.05);扫描电镜示藻酸锶凝胶呈典型的"鸡蛋箱"样结构,孔隙直径大小平均为150μm;接种于凝胶中7 d后可见细胞均匀黏附于凝胶壁生长。[结论]藻酸锶凝胶是一种优良的细胞支架,将其复合种子细胞应用于骨组织工程具有广阔的前景。
[Abstract]:[Objective] to observe the rabbit bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) changes in morphology and activity in vitro in three-dimensional alginate gel for strontium, strontium alginate gel composite application of stem cells in bone tissue engineering provides a theoretical basis. Methods the cultured rabbit BMSCs and amplified, and the third generation of BMSCs in cell density 5 x 105 /ml in alginate gel composite strontium cultured daily by inverted phase contrast microscope at different time points, the Live/Dead staining to measure the cell survival, cell proliferation was detected by CCK-8, adhesion. Results SEM was used to observe the ultrastructure and cell gel in the gel. Strontium alginate gel soft, transparent, good permeability; BMSCs were inoculated in alginate gel in the initial form of strontium is round, was suspended growth, after the cells were adherent and star shaped or polygon; first D and fourteenth d with gel live fine The cell rate was (88.61 + 4.08)% and (92.16 + 2.10)%, there was no statistically significant difference between the two groups (P0.05); the 4,7,10,13 D group was significantly higher than that in the two-dimensional culture od three-dimensional culture group (P0.05); scanning electron microscope showed that strontium alginate gel showed a typical "egg box" structure, pore the average diameter of 150 m to 7 d after inoculation; cell adhesion in visible uniform gel gel wall growth. Conclusion] strontium alginate gel is a kind of excellent scaffold, the composite of seed cells in bone tissue engineering has broad prospects.

【作者单位】： 南昌大学医学院;南昌大学第二附属医院骨一科;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:81060147)
【分类号】：R318.08

【参考文献】

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