流体剪切应力对晚期内皮祖细胞生物学功能的影响

发布时间：2018-02-23 23:51

  本文关键词： 剪切应力 内皮祖细胞 细胞黏附 再内皮化　出处：《医用生物力学》2014年01期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的研究流体剪切应力处理对晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)体外及体内生物学功能的影响。方法密度梯度离心法分离大鼠骨髓单核细胞,应用EGM-2MV进行体外培养。以3~4代的EPCs,即晚期EPCs为靶细胞,对其施以1.2 Pa剪切应力处理。采用EdU标记技术、黏附能力测定实验、改良的Boyden小室、Annexin V/PI、β-半乳糖苷酶检测法、Matrigel法、荧光定量RT-PCR等方法分别检测剪切应力对晚期EPCs增殖、黏附、迁移、凋亡、衰老、体外成血管及VEGF mRNA表达等生物学功能的影响。应用大鼠颈动脉损伤模型及细胞原位移植等实验手段检测剪切应力预处理对晚期EPCs修复受损内皮的影响。结果 1.2 Pa剪切应力处理可不同程度提高晚期EPCs的增殖、黏附、迁移及成血管能力(P0.01),上调VEGF的基因表达,抑制晚期EPCs的衰老及凋亡(P0.01);移植经剪切应力预处理的晚期EPCs可加速损伤内皮的修复,减缓内膜的增生。结论流体剪切应力可改善晚期EPCs的功能活性,提高晚期EPCs修复损伤血管内皮的能力,这为EPCs的临床应用及剪切应力介导的细胞疗法提供了实验依据。
[Abstract]:Objective to study the effects of fluid shear stress on the biological function of late endothelial progenitor cells (EPCs) in vitro and in vivo. Methods the bone marrow monocytes of rats were isolated by density gradient centrifugation. EGM-2MV was used for culture in vitro. The cells of 3 or 4 passages of EPCs were treated with 1.2 Pa shear stress. The modified Boyden chamber Annexin V / Pi, 尾 -galactosidase assay and Matrigel method were used. Fluorescence quantitative RT-PCR was used to detect the effects of shear stress on the proliferation, adhesion, migration, apoptosis and senescence of advanced EPCs. Effects of vascular formation in vitro and expression of VEGF mRNA on vascular formation and expression of VEGF mRNA in vitro. The effects of shear stress preconditioning on the repair of damaged endothelium in late EPCs were investigated by using rat carotid artery injury model and orthotopic transplantation of cells. Pa shear stress treatment could increase the proliferation of EPCs in different degree. The adhesion, migration and vascularization ability of P0.01a can up-regulate the expression of VEGF gene, inhibit the senescence and apoptosis of late EPCs, and accelerate the repair of damaged endothelium after transplantation of late EPCs pretreated by shear stress. Conclusion fluid shear stress can improve the functional activity of advanced EPCs and improve the ability of late EPCs to repair injured vascular endothelium, which provides experimental basis for clinical application of EPCs and shear stress mediated cell therapy.
【作者单位】： 潍坊医学院基础医学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(30900290,31270993) 国家教育部“新世纪优秀人才计划”资助项目(NCET-10-0922) 山东省自然科学基金资助项目(ZR2011CQ030) 山东省医药卫生科技发展计划(2011QZ024)
【分类号】：R318.01

【参考文献】

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【共引文献】

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