兔BP-EPCs对自体BMSCs体外扩增和分化能力的影响研究

发布时间：2019-02-18 13:30

【摘要】：[目的]通过研究大耳白兔外周血来源的血管内皮祖细胞(BP-EPCs)对骨髓来源间充质干细胞(BMSCs)体外增殖和分化能力的影响,筛选更有潜力两种细胞共培养系统从而为构建组织工程骨的基础研究和临床治疗提供更多的资料支持。[方法]通过密度梯度离心法结合贴壁法分离纯化兔EPCs和BMSCs,实验分两组:PB-EPCs和BMSCs间接共培养组中BMSCs为实验组,单独BMSCs组为对照组。观察两组细胞形态。对两组第三代细胞进行成骨和成脂诱导并评估两组BMSCs分化能力。[结果]两组细胞体外培养形态规则,增殖能力强,生长曲线呈S型。其中兔EPCs和BMSCs间接共培养组较BMSCs单独培养组细胞增长速度更快,两组差异具有统计学意义(P0.05)。经成骨诱导后,间接共培养组BMSCs出现钙结节时间早且茜素红染色较深,碱性磷酸酶和骨钙素分泌量较单独BMSCs组显著增高,两组差异具有统计学意义(P0.05)。经成脂诱导后,间接共培养组油红O染色较深,两组差异具有统计学意义(P0.05)。[结论]兔EPCs和BMSCs间接共培养组细胞在增殖速度和分化能力方面均优于BMSCs单独培养组,提示将BP-EPCs和BMSCs共培养系统作为种子细胞构建组织工程骨有更大的使用潜能。
[Abstract]:[objective] to study the effect of vascular endothelial progenitor cells (BP-EPCs) from peripheral blood of white rabbits on the proliferation and differentiation of bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMSCs) in vitro. Screening of two cell coculture systems has more potential to provide more data for the basic research and clinical treatment of tissue engineering bone. [methods] EPCs and BMSCs, were isolated and purified by density gradient centrifugation combined with adherent method. The two groups were divided into two groups: in the PB-EPCs and BMSCs coculture group, BMSCs was used as the experimental group and the BMSCs group as the control group. Cell morphology was observed in both groups. The third generation cells were induced by osteogenesis and adipogenesis and the differentiation ability of BMSCs was evaluated. [results] the cells of the two groups were cultured in vitro with regular morphology, strong proliferative ability and S-shaped growth curve. The rate of cell growth in EPCs and BMSCs indirect co-culture group was faster than that in BMSCs alone group, and the difference between the two groups was statistically significant (P0.05). After osteogenesis induction, BMSCs in indirect co-culture group appeared calcium nodule earlier and alizarin red staining was deeper, alkaline phosphatase and osteocalcin secretion were significantly higher than those in BMSCs group, the difference between the two groups was statistically significant (P0.05). After fat-forming induction, indirect co-culture group oil red O staining was deeper, the difference between the two groups was statistically significant (P0.05). [conclusion] the proliferation rate and differentiation ability of rabbit EPCs and BMSCs indirect co-culture group were better than that of BMSCs alone group, suggesting that BP-EPCs and BMSCs co-culture system could be used as seed cells to construct tissue engineered bone.
【作者单位】： 昆明医科大学第一附属医院整形外科;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:81460298):《功能性微血管化自体生物骨动态追踪及基因筛选》
【分类号】：R687;R318.08

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