富含血小板血浆联合细胞膜片技术构建可注射组织工程软骨

发布时间：2019-08-14 06:52

【摘要】：自体软骨细胞移植(Autologous chondrocyte transplantation, ACT)已经成功的应用于关节软骨缺损的临床治疗。然而,传统的手术方法会不可避免的给患者带来二次伤害。可注射生物降解支架材料的出现为体内软骨组织再生提供了令人满意的治疗平台,因为它不受缺损形状的限制,并且可以通过微创手术实现组织修复。人们已经对富含血小板血浆(Platelet-rich Plasma, PRP)凝胶应用于结缔组织再生进行了广泛的研究,其良好的生物相容性和易获得的优点使它成为组织工程中极具前景的细胞治疗载体。但是,PRP凝胶也存在着诸如机械性能较差和体内快速降解的缺点,这会导致修复组织收缩、形变,使软骨再生受到限制。实验目的：在这项研究中,我们使用PRP和颗粒化的软骨细胞膜片(Chondrocyte Bricks,CB),以及细胞为材料,提出一种新的构建可注射组织工程软骨的策略。我们期望Chondrocyte Bricks能够改善PRP的机械性能,形成具有稳定外形和均一组织结构的软骨组织。方法和结果： 1.将PRP、Chondrocyte Bricks (CB)和软骨细胞混合,注射到裸鼠背部皮下。8周后观察移植物形态,并对该组织工程化软骨特性进行分析。大体观察和组织学检查显示,使用PRP-CB与软骨细胞能够构建出形态稳定、结构均一的可注射组织工程软骨。提出PRP-CB模型。 2.使用MSCs替代软骨细胞进行同样实验。结果显示,外围的MSCs发生骨化,内部的MSCs最终分化为脂肪组织,PRP-MSCs Bricks模型并不能形成软骨组织。 3.使用PRP-CB为内支架,以MSCs为种子细胞,注射到裸鼠背部皮下,分别于2周、周、8周观察MSCs向软骨细胞方向分化的程度,并以PRP-软骨细胞外基质颗粒(PRP-ECM Bricks)为对照,探讨微环境对MSCs软骨向分化的影响。结果显示PRP-CB模型能够诱导MSCs向软骨细胞分化并能够维持表型。 4.使用PRP-CB-MSCs对兔关节软骨缺损进行修复,观察该方法对关节软骨缺损的功能性修复。组织学检查证明,该方法能够促进关节软骨修复,产生新的软骨组织。结论：PRP-CB模型能够维持可注射软骨的外部形态,所形成的内部结构营造了适合于软骨细胞生长的微环境,它能够在体内诱导MSCs向软骨方向分化形成新生软骨,并阻止外部血管侵入,维持软骨细胞表型。该模型为构建可注射组织工程软骨提供了新的策略。
【学位授予单位】：西北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R318.17

【共引文献】