海藻酸—壳聚糖—磷酰胆碱微囊包裹胰岛的生物相容性研究

发布时间：2019-10-10 20:25

【摘要】：[摘要] 目的探讨磷酰胆碱修饰的新型海藻酸-壳聚微囊包裹胰岛对微囊生物相容性的影响。 方法应用静电微囊发生技术获得磷酰胆碱修饰的海藻酸-壳聚糖微囊；通过红外光谱分析和X射线光电子能谱分析,来鉴定磷酰胆碱是否成功接枝于壳聚糖上；利用考马斯亮蓝法分别测定单纯壳聚糖和磷酰胆碱修饰的壳聚糖对牛血清白蛋白的吸附量；通过AO/PI染色检测微囊胰岛细胞活力；采用葡萄糖刺激试验评价微囊胰岛和单纯胰岛的胰岛素释放功能；将海藻酸-壳聚糖-磷酰胆碱微囊(实验组)和海藻酸-壳聚糖微囊(对照组)分别植入小鼠腹腔,4周后回收微囊,计数回收微囊量,并通过HE染色评价囊周纤维化情况。 结果所得微囊大小均一,表面光滑；红外光谱和X射线光电子能谱分析均证实磷酰胆碱成功修饰壳聚糖；单位质量的壳聚糖及磷酰胆碱修饰物所吸附的蛋白质量分别为189.4μg/mg和90.5μg/mg,差异有统计学意义(t=5.549,P0.05)；AO/PI染色可见微囊胰岛细胞活性尚可；微囊植入腹腔后,实验组囊表面细胞反应较对照组轻微,未见明显的纤维化形成,实验组和对照组的微囊回收率分别为(69.6±10.8)%和(10.45±1.95)%,P0.05,差异有统计学意义；实验组微囊包裹胰岛与单纯胰岛在低糖溶液中,胰岛素浓度分别是(3.298±1.680)uIU/ml和(4.299±1.159)uIU/ml(t=1.096,P0.05),而在高糖溶液中分别是(11.783±4.175)uIU/ml和(12.875±2.268)uIU/ml(t=0.514,P0.05),均无统计学差异。 结论磷酰胆碱修饰后,可显著减少壳聚糖对蛋白质的吸附,改善体内海藻酸-壳聚糖微囊的纤维化情况。因此,磷酰胆碱修饰可提高海藻酸-壳聚糖微囊的生物相容性,同时不影响微囊胰岛生物学功能,更适用于微囊胰岛移植治疗糖尿病。
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图3. A海藻酸-壳聚糖微囊，，B海藻酸-壳聚糖-磷酰胆碱微囊，C海藻酸-克聚糖-磷酰胆碱微囊包裹胰岛（X 100倍）2.a惪岬╪懦晒π奘慰蔷厶

本文编号：2547317